玉米杂交种新科891及其亲本SSR 指纹图谱的构建

张瑞平 周联东 王文洁 孙 佩 王 蕊 刘经纬 李和顺 王学军

（河南省新乡市农业科学院，新乡453000）

玉米杂交种和亲本遗传真实性是种子质量的重要标志之一，直接影响着玉米生产的产量和质量[1]。新品种逐年增加，高频率使用骨干自交系使品种的遗传基础趋于狭窄，加大了品种鉴定的难度[2]。同工酶和蛋白电泳多态性不够丰富，试验条件要求严格，鉴定结果稳定性低[3]，已经不能很好地鉴定种子的真实性和纯度。SSR 标记因具有快速、准确、信息含量高、呈共显性分离、易于分析、重复可靠等优点，在分析自交系亲缘关系[4-5]和杂交种纯度[6-8]等方面发挥了重要作用。赵久然等[9]建立了46 个玉米自交系和杂交种的DNA 指纹图谱数据库，为更好地鉴定种子的纯度和真实性提供了方便。

新科891 于2018 年通过国家农作物品种审定委员会审定，审定编号：国审玉20186115。本文利用SSR 分子标记技术，对新科891 及其亲本进行分析，构建SSR-DNA 指纹图谱，并将SSR 引物扩增的条带数字化，计算出现相同数字指纹图谱的概率，以期为更准确地鉴定该品种提供参考依据。

1 材料与方法

1.1 试验材料 杂交种新科891 及其父本PHA458和母本S155 均由河南省新乡市农业科学院玉米课题提供。试验所用DNA 聚合酶、dNTP 购买于宝生物工程（大连）有限公司。用于SSR 分析的56对引物序列来自玉米基因组数据库（http：//www.maizegdb.org/ssr.php），由上海生物工程股份有限公司合成。

1.2 试验方法

1.2.1 DNA 提取 将杂交种新科891 及其亲本PHA458 和S155 种子沙培，置于30℃培养箱暗培养。3 叶1 心时取叶片混样，用CTAB 的方法提取总DNA[10]，紫外分光光度计检测DNA 的质量和浓度，加水稀释至25ng/μL，-20℃保存备用。……