Na+/K+ATPase介导甘草诱导低钾血症的研究

张亚倩,徐鹏程,张琴,徐榕,张文峰,沈晗,陶嫦立,邵红伟

(广东药科大学生命科学与物物制药学院,广东省生物技术候选药物研究重点实验室,广东 广州510006)

甘草是豆科甘草属中一类多年生的草本植物，是一味大宗药材,具有补脾益气、清热解毒、润肺止咳、调和诸药之功效,素有 “十药九草”、“无草不药”之称[1]。甘草化学组成极为复杂，含有多种化学成分，主要成分有甘草酸、甘草甙等。大量的研究表明，甘草酸和黄酮类物质是甘草中最重要的生理活性物质，甘草虽然具有良好的药用价值，但是过量服食甘草却会有一些不良反应。从1994年开始，已有很多研究表明[2-8]，长期服用甘草片或者含有甘草类药物，会导致低钾血症。K+的主要生理作用是维持细胞的正常代谢与酸碱平衡、细胞膜的应激性和心肌的正常功能。血清K+浓度<3.5 mmol/L称为低钾血症,可出现一系列的症状和体征[9]。已有报道显示[10]，甘草导致低钾血症的主要机制是甘草酸经肠道菌降解后生成甘草次酸，甘草次酸的化学结构与皮质酮相似，可模拟醛甾酮发挥肾上腺盐皮质激素样作用。且已有研究发现低钾血症甚至会引起横纹肌溶解[11-14]。本研究进一步探索Na+/K+ATPase在甘草性低钾血症中的作用，为临床研究提供参考。

1 材料与方法

1.1 试剂与仪器

甘草产地甘肃，产品批号YPA6A0002,经广东药科大学杨全教授鉴定为豆科植物甘草GlycyrrhizauralensisFisch；甘草酸购于广州华奇盛生物科技有限公司；乌苯苷购于广州威佳科技有限公司；SBRY GREEN购于上海翊圣生物科技有限公司，GoScriptTMReverse Transcription System购于北京promega公司。

旋转蒸发仪RE311(上海Yamato科技)；BSA124S-CW分析天平TLE204(德国Sartorius公司)；VORTEX-6涡旋混合仪(海门市其林贝尔仪器制造有限公司)；LightCycler480Ⅱ(瑞士Roche公司)；Olympus AU5431全自动生化分析仪(日本Olympus公司);贝克曼库尔特iRICELL 3000全自动生化仪(美国BeckmanCoulter公司)。

1.2 实验动物

SPF级8周龄BALB/C小鼠15只，雄性，体质量18～22 g，购于广州中医药大学动物实验中心，生产许可证号SCXK(粤)2013-0034。

1.3 甘草水提物的制备

精确称取甘草25 g，加入屈臣氏蒸馏水100 mL浸泡20 min,60 ℃煎煮2 h，使用8层纱布过滤于烧杯中；……