豆清液不同超滤组分体外抗氧化活性研究

□ 吴 静 陈才霞 刘晶晶 胡萌萌 尹乐斌 邵阳学院食品与化学工程学院

豆清液是指点浆工艺中蛋白质变性沉淀时析出的上清液或豆腐倒脑时产生的废水，据统计，每加工1 t大豆可排放出2～5 t豆清液[1]。豆清液所含营养物质丰富，化学需氧量、生物化学需氧量分别约为1 800～2 400 mg/L、4 000～ 6 000 mg/L，直接排放会造成严重的环境问题。大豆多肽具有高营养价值，具有抗氧化、降低胆固醇、抗肥胖和促进免疫功能等[2]，有关豆清液的高值化利用是目前的研究热点。本文以豆清液为研究对象，将其通过不同滤膜进行超滤，评价不同超滤组分的抗氧化活性，为豆清液的综合利用提供理论基础。

1 材料与方法

1.1 样品与试剂

豆清液：实验室自制；过硫酸钾、三水合醋酸钠：西陇化工股份有限公司；DPPH、TPTZ、ABTS：上海如吉生物科技发展有限公司；其他试剂均为常见分析纯。

1.2 仪器设备

MSM2013超滤机组：上海摩速科学器材有限公司；分析光度计：上海舜宇恒平科学仪器有限公司；分析天平：梅特勒托利多仪器有限公司。

1.3 试验方法

1.3.1 豆清液超滤处理

对已经粗过滤后的豆清液采取分别经过10 kDa、5 kDa、3 kDa、800 Da、300 Da超滤膜截留分离，分别收集渗透液作为样品液。依次制备分子量为110 kDa、10 kDa、5 kDa、3 kDa、800 Da的不同组分滤液，然后测定各组分溶液的抗氧化活性。

1.3.2 抗氧化活性测定

DPPH自由基清除率测定参考Moyo B[3]等的方法；OH自由基清除率测定参考Smirnoff N[4]等的方法；ABTS自由基清除率测定参考Re R等[5]的方法。

2 结果与分析

2.1 豆清液不同超滤组分对DPPH自由基清除能力的测定结果

豆清液不同超滤组分对DPPH自由基的清除率如下表1，经方差分析可知，按照显著性水平P＜0.05分成了5个层次（a、b、c、d与e），10 kDa、3 kDa超滤膜处理前所得到的分子量组分之间的差异不显著，其清除率最高为91.81%±3.43%。5 kDa膜前和膜后得到的分子量清除率差异不显著。10 kDa膜后与800 Da膜后的组分差异不显著，但清除率最低，为38.12%±3.12 %。总的来说，10 kDa、3 kDa、800 Da膜前与膜后的DPPH清除率组分差异显著（P＜0.05）。

2.2 豆清液不同超滤组分对羟基自由基（OH）清除能力的测定结果

豆清液不同超滤组分对OH自由基清除率见表2，经方差分析，9组样品液按显著性水平P＜0.05羟基清除率分成了4个层次（a、b、c、d）。10 kDa膜后、5 kDa膜前、3 kDa膜前与膜后、800 Da膜后这5个样品组清除率较高，且差异不显著。分别过膜的超滤方式得到的样品液在10 kDa膜后的清除率最高，为94.72%±3.36 %。10 kDa、5 kDa、800 Da膜前与膜后组分差异显著。

2.3 豆清液不同超滤组分对ABTS自由基清除能力的测定结果

豆清液不同超滤组分对ABTS自由基清除率如下表3。

表1 豆清液不同超滤组分对DPPH自由基清除率（单位：%）

表2 豆清液不同超滤组分对OH自由基清除率（单位：%）

表3 豆清液不同超滤组分对ABTS自由基清除率（单位：%）

经方差分析可知，豆清液用分别过膜得到的组分ABTS自由基清除率按显著性水平P＜0.05呈现出4个层次（a、b、c与 d）。10 kDa、5 kDa与800 Da膜前与膜后的组分清除率差异显著，10 kDa膜后组分最高，为99.58%±0.08 %；而3 kDa膜前与膜后的组分清除率差异。

3 结论

将豆清液分别过膜通过孔径110 kDa、10 kDa、5 kDa、3 kDa与800 Da的滤膜，其DPPH自由基、ABTS自由基、OH自由基清除率非常高，说明豆清液原液是一种具有极强抗氧化活性的原料，为其高值化利用提供了理论数据。