贵阳地区5 151例医院就诊女性HPV感染亚型分析

杨 丹，韩 然，罗振元，徐筱婧，李媛媛，余姝妮，王茹蕾，刘兴梅，黄盛文△

(1.贵州省人民医院检验科，贵州贵阳 550002；2.贵州省人民医院消化内科，贵州贵阳 550002)

宫颈癌是继乳腺癌之后的威胁女性健康的第二大类恶性肿瘤，给广大女性带来了巨大的身心痛苦和沉重的经济负担。人乳头瘤病毒(HPV)是一类属于乳多空病毒科的球形DNA病毒，主要感染皮肤和黏膜，可导致鳞状上皮增殖，引发良性增生性病变或者恶性肿瘤。目前已鉴定出的200多种HPV基因亚型中有至少有42种与生殖道感染有关，且致病力大小或致癌危险性差异巨大。大量实验室研究及流行病学调查资料表明，高危型HPV持续感染是导致宫颈上皮内瘤变和宫颈癌的主要原因[1-2]。目前，宫颈癌是唯一一种经过临床干预可以有效预防的癌症。所以了解医院机会性筛查人群HPV各亚型的感染情况，能够为宫颈癌重点人群的筛查、随访及宫颈HPV疫苗的开发及临床应用提供理论依据。本研究收集了贵州省人民医院2018年检测的5 151例HPV分型结果，分析贵阳及周边地区女性HPV的感染及亚型分布现状，为此地区宫颈癌患者的防治提供临床数据支持。

1 资料与方法

1.1一般资料 选择2018年5月至11月在贵州省人民医院就诊、行HPV分型检查的5 151例女性为研究对象，包括了妇科、妇科门诊、生殖医学科和体检中心患者，年龄19～77岁，平均年龄48岁。所有患者均自愿接受HPV分析检测。

1.2仪器与试剂 北京博晖创新光电技术股份有限公司微流控全自动医用核酸分子检测仪(型号BHF-VI)，配套使用HPV核酸扩增分型检测试剂盒，通过微流控芯片对24种HPV亚型进行检测、分型。该实验采用微量点样技术，将各位点检测探针与各种质控探针固定在杂交膜上，其中24种亚型HPV检测探针、空白对照、阴性对照各1个点，内参质控探针有3个不同浓度，每个浓度各1个点，显色质控探针重复3个点。全部检测流程严格按照试剂盒说明书进行。

1.3方法

1.3.1样本采集及保存 使用宫颈脱落细胞取材器(北京博晖创新光电技术股份有限公司提供)置于宫颈口取宫颈脱离细胞，取材后刷头浸泡于专用保存液中，4 ℃保存，24 h内进行检测。

1.3.2样本检测 使用HPV核酸扩增分型检测试剂盒(北京博晖创新光电技术股份有限公司)，采用微流控芯片技术进行HPV分型检测，包括18种高危型(HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68、83、53、66、73、82)和6种低危型(HPV6、11、41、42、43、81)。全部检测流程严格按照试剂盒说明书进行。

1.3.3结果判读 根据微流控芯片上HPV各亚型的分布图，判断HPV的基因亚型，质控点GB和SP应均为阳性。24个HPV亚型中的任意一个为阳性则判断为单一HPV感染；同时出现两个及两个以上亚型阳性，则判断为HPV多重感染。

1.4统计学处理 所有数据处理采用统计软件SPSS19.0进行。计数资料数据采用百分率(%)表示。构成比和组间率的比较采用χ2检验，以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1女性HPV感染概况 本研究中，5 151例就诊患者中有1 484例为HPV阳性患者,总感染率为28.81%(1 484/5 151)，其中1 044例为单一感染，占全部就诊患者的20.27%(1 044/5 151)，440例为多重感染，占全部就诊患者的8.54%(440/5 151)。

2.2女性HPV感染各型的分布及感染率 在本院筛查出HPV单一亚型阳性的1 044例女性中，高危亚型阳性者为894例，占全部就诊患者的17.36%(894/5 151),占HPV单一亚型阳性者的85.63%(894/1 044)。最常见的HPV高危亚型是52型，感染率为(215/5 151)4.17%，占单一亚型阳性高危型感染者的24.05%(215/894)，其次为HPV16型，感染率为3.44%(177/894)，第三为HPV58型，感染率为2.33%(120/894)。低危亚型中，以HPV81、42亚型较为常见，阳性患者数分别为37、32，感染率分别为0.72%和0.62%。见表1。

表1 HPV单一亚型感染的分布及感染率

续表1 HPV单一亚型感染的分布及感染率

注：*表示计算5 151例就诊患者中的感染率

2.3女性HPV多重感染概况 在本院筛查出HPV多重感染的440例女性中，以二重感染最常见，占全部就诊患者的5.65%(291/5 151)，占多重感染患者总数的66.14%(291/440)；随感染亚型数量的增多，三重感染、四重感染和五重及以上感染的感染人数逐渐减少。97例为三重感染，占全部就诊患者的1.88%(97/5 151)，占多重感染患者总数的22.05%(97/440)。30例为四重感染，占全部就诊患者的0.58%(30/5 151)，占多重感染患者总数的6.81%(30/440)。五重及以上HPV感染的患者有22例，占全部就诊患者的0.43%(22/5 151)，占多重感染患者总数的5%(22/440)。最多可见9种HPV亚型同时感染。各多重感染类型组间构成比比较，差异有统计学意义(χ2=21.30，P<0.01)。见表2。

表2 HPV多重感染的分布及感染率

2.4HPV单一感染的年龄分布特点 按照年龄分组后，单一感染患者中，31～40岁组患者HPV阳性率最高，占比为28.93%(302/1 044)，以此年龄段为“分水岭”，41～50岁组HPV阳性率第二，占比为26.34%(275/1 044)，而20～30岁组患者的占比则为20.69%(216/1 044)，位居第三。20岁以下组的占比最低，仅占0.96%(10/1 044)。感染率较高的年龄组是51～60岁组及60岁以上组，分别达到24.79%(75/279)和26.88%；<20岁组感染率最低，仅为18.18%(10/55)。各年龄组间单一型HPV感染率比较，差异有统计学意义(χ2=13.54，P<0.01)。见表3。

2.5HPV多重感染的年龄分布特点 从年龄分布情况来看，在440例多重感染患者中，20岁以下组患者多重感染率高达25.45%；其次是60岁以上组，多重感染率为12.19%。而21～30岁组、31～40岁组和41～50岁组的多重感染率的占比位居前三，构成比分别为22.95%、24.32%和24.09%。上述现象与HPV单一型感染的年龄分布基本一致。在本项目统计中，最常见的多重感染类型为：HPV52与HPV51共感染、HPV52与HPV16共感染、HPV52与HPV58共感染。各年龄组间多重HPV感染率比较，差异有统计学意义(χ2=6.02，P<0.05)。见表4。

表3 HPV单一感染患者的年龄分布概况

表4 HPV多重感染患者的年龄分布概况

3 讨 论

在我国，宫颈癌居于女性癌症发病率的前十位，在女性肿瘤中的发病率仅次于乳腺癌，且近十年来发病率不断上升并呈年轻化的趋势[3]。2018年9月，世界卫生组织国际癌症研究中心发布的全球癌症统计数据中指出，宫颈癌是世界女性生殖系统发病率第二的恶性肿瘤，发病率达到7.5%[4]。高危型HPV持续性感染是宫颈癌的主要危险因素，几乎所有的宫颈癌症都是由HPV引起，其中大部分的宫颈癌可以归咎于HPV16和18型[5]。此外，还有十多种亚型的HPV病毒可以导致宫颈癌，比如HPV45和31。单一HPV感染可是宫颈癌的患者风险增加19.9倍，多重HPV感染曾使宫颈癌风险增加到31.8倍[6]。所以，尽早发现HPV感染，做到早诊、早治、早预防是降低宫颈癌发病率的有效手段。

HPV感染率在不同国家和地区、不同民族间有很大的区别。在世界范围内，HPV的平均感染率为10.4%，亚洲最低，为8.0%，非洲最高，为22.1%[7]。我国范围内，各省市的HPV感染率也有较大差异。本研究通过对就诊于贵州省人民医院的5151例女性患者进行HPV检测，发现贵阳及周边地区的HPV阳性感染率为28.81%，与重庆市人群中HPV阳性率28.61%[8]、河南省HPV阳性率28.7%[9]接近，虽然高于成都地区的17.6%[10]、广东深圳的13.8%[11]，但是低于我国云南地区的38.1%[12]、北京的34.7%[13]。本研究中HPV的总阳性率较高，可能与本地区医生及女性人群的宫颈癌筛查意识增强及检测手段改进有关。

根据致病力及危害程度不同，HPV亚型被粗分为高危型及低危型。在本研究中，单一型HPV感染以高危型HPV感染为主，在单一感染中的构成比达85.62%，其中以HPV52、16和58型最为常见，感染率分别为4.17%、3.44%和2.33%，构成比分别为24.05%、19.80%和13.42%；其后排序依次为HPV39、68、53、51、18、33、56、59、66、31、35、82、45、83和73。低危型HPV感染中检出率前三位是HPV81、42、11，其后是6、43和44亚型。通过HPV相关文献复习，本课题组发现贵阳地区的HPV优势型别的感染率与其他省份和地区不尽相同，但与我国常见的HPV优势型别的类型基本一致，仅排序略有不同。李凌佳等报道昆明地区高危型感染率的前3位同样为HPV52、16和58型[14]，但是河北地区高危型HPV优势型别为HPV16、58、52[15]，成都地区高危型HPV优势型别为HPV52、58、16[16]，江苏徐州高危型HPV优势型别为HPV16、52、58[17]。而在世界范围内，HPV感染率最高的亚型是HPV16、18和31型[18]。到目前为止，已有三种预防性HPV疫苗进行商业化生产，其中覆盖率最高的九价疫苗也只包括了五种高危型HPV亚型感染，即HPV16、18、31、33、45、52和58型。此外，HPV疫苗不能用于已感染者，不能防止所有高危亚型，而且推广和接种率较低。因此了解各地区HPV感染现状及优势型别对于宫颈癌的防治及针对性的HPV疫苗研发具有指导意义。

HPV多重感染是指在某一个体中同时检测到2种或2种以上的HPV亚型。有研究显示，多重HPV感染能促进宫颈病变的发展[6]。在本研究中，HPV多重感染率为8.54%，与赵俊琴等[19]报道的山西8.68%多重HPV感染率相似，但是高于裴蕴锋等[17]报道的江苏徐州地区5.76%多重HPV感染率和李霞等[16]报道的成都地区的4.2%多重HPV感染率。本研究中最常见的多重感染类型为HPV16与HPV52共感染、HPV52与HPV58共感染、HPV16与HPV56共感染。研究显示，HPV感染亚型增多能使宫颈癌发病风险增高[20]。故应对高危型HPV感染者，尤其是多重感染人群进行定期随访检测，能及早发现宫颈病变。

既往的流行病学调查研究显示，HPV感染率的年龄分布呈V形，感染率高峰出现在20～24岁和40～49岁组，而感染率最低组为30～34岁组[21]。而本研究结果略有不同，单一型HPV感染率随年龄增高而增加，多重HPV感染率的年龄分布却基本成V形。本研究中，60岁以上组单一型HPV感染率最高，可能是由于绝经后机体免疫力降低，HPV清除功能现将所致。而在多重感染患者中，20岁以下组感染率远远高于其他年龄组，这可能与此组人数较少且缺乏两性知识及女性卫生保健知识有关。

4 结 论

基于机会性筛查来源的5 151例患者的分析，基本明确了贵阳地区HPV感染的流行病学特征，总结如下：(1)贵阳地区女性HPV感染率为28.81%，总体偏高，且具有独特的年龄分布特点；(2)最常见的HPV感染高危亚型是HPV52、16和58型；多重型HPV感染以HPV52与HPV51共感染的二重感染最常见。本研究明确了本地区患者的HPV感染情况及亚型分布特点，可以为宫颈癌患者的防治提供参考。