Wnt信号通路在狼疮性肾炎发病过程中的作用

许昊 周静 雷尚文 王铭浩 张凯 王研 梁刘娜 周淑红

【摘 要】目的：观察分析Wnt信号通路在狼疮性肾炎发病过程中的作用。方法：选取本院（在2018年2月-2019年2月）搜集的39例狼疮性肾炎患者一般资料（均经皮肾脏实施穿刺手术，作为实验组），再搜集同期我院收治的38例肾癌患者癌旁正常组织的一般资料（作为对照组）。采用统计学分析两组研究对象肾脏β一catenin mRNA水平（应用实时定量聚合酶链式反应检测方法）、β一catenin蛋白水平（应用Western印迹法加以检测）。结果：实验组狼疮性肾炎患者的肾脏β一catenin mRNA水平、β一catenin蛋白水平显著高于对照组（P<0.05）。结论：Wnt信号通路可能参与狼疮性肾炎的发病过程。

【关键词】Wnt信号通路;狼疮性肾炎;发病过程;作用

【中图分类号】R593.242【文献标识码】B【文章编号】1002-8714（2020）01-0157-02

系统性红斑狼疮的临床表现多样且病情严重程度不一，调查研究显示，系统性红斑狼疮好发于女性人群[1]。系统性红斑狼疮的发病机制较为复杂，会产生大量针对自身抗原的抗体，继而使得组织器官受损。狼疮性肾炎是系统性红斑狼疮累及肾脏组织的肾炎疾病，少数系统性红斑狼疮患者以肾脏受累为首发表现。狼疮性肾炎是导致系统性红斑狼疮患者死亡的主要因素。狼疮性肾炎的临床表现较为复杂，主要表现在：其一，蛋白尿;其二，血尿;其三，高血压等。目前来看，虽然深入了解系统性红斑狼疮疾病的具体发生机制，但是对于狼疮性肾炎的进展具体分子机制尚未深入了解。Wnt基因是癌基因，参与胚胎发育以及肿瘤发生的过程，除此之外，Wnt信号在肾脏疾病的发生和发展过程中也起着重大作用。有学者认为，正常机体肾脏的Wnt信号是沉默的，但是肾脏损伤后Wnt信号被激活[2]。Wnt/β一catenin是重要细胞信号的转导通路，Wnt糖蛋白与Fz蛋白受体有机结合后会在细胞表面聚集，继而激活β一catenin聚集。最新研究结果显示，Wnt/β一catenin通路可参与狼疮性肾炎的发病过程。

1 资料与方法

1.1一般资料

实验组有30例女患者、9例男患者;平均年龄为（55.3±4.8）岁;病理分型：8例III型、10例IV型、21例V型。对照组中有29例女患者、10例男患者;平均年龄为（57.7±3.4）岁。

1.2方法

应用实时定量聚合酶链式反应检测方法检测β一catenin mRNA水平，收集细胞，漂洗PBS（磷酸盐缓冲液），离心，将蛋白质样品加入凝胶缓冲液中混合均匀，煮沸，再将梳齿插入浓缩胶中，静置0.5h，备用;在电泳槽内加入缓冲液，用微量加样器制备好蛋白样品;将β一catenin抗体稀释为1：3000，使用β一catenin灰度值表示相对表达水平。

应用Western印迹法加以检测β一catenin蛋白水平，将各组细胞加入裂解液中，混匀后，室温下静置5分钟;将样品分成有机相、水相，将水相转移到新管中进行下一步操作;加入无水乙醇，将溶液与沉淀物转入吸附柱中;将RNA反转录成cDNA，严格按照cDNA说明书加以操作。

1.3观察指标

分析两组研究对象肾脏β一catenin mRNA水平、β一catenin蛋白水平。

2 结果

实验组狼疮性肾炎患者的肾脏β一catenin mRNA水平、β一catenin蛋白水平显著高于对照组（P<0.05），见表1。

3 讨论

有关研究显示，Wnt信号通路可分为两种类型：其一，经典信号通路（Wnt/β一catenin）;其二，非经典信号通路[3]。β一catenin信号处于中心位置之中，当Wnt信号通路被激活时，一些因素会使得残基被糖原合成激酶磷酸化-3β活性被抑制，残基被糖原合成激酶磷酸化-3β无法使得β一catenin降解。当细胞内的β一catenin数量达到一定程度时间会与TCF（T细胞因子）/LEF（淋巴细胞增强因子）结合，继而使得某些特定基因表现出增强或减弱。Wnt信号通路在肾脏胚胎组织发育初期产生重大作用，可积极参与肾小管的发育中。多项研究资料显示，Wnt信号通路参与肾囊肿的形成之中。β一catenin活化在腎细胞癌的有关研究中受到一定程度抑制，因此表明Wnt/β一catenin在肾脏疾病中出现异常表达情况，但是在狼疮性肾炎患者的发病过程中却未见诸多报道。本文研究结果显示实验组狼疮性肾炎患者的肾脏β一catenin mRNA水平、β一catenin蛋白水平显著高于对照组（P<0.05）。有关学者在狼疮性肾炎患者的发病过程中表明，某种因素激活Wnt信号通路，使得细胞外基质可发生重建，在多次的修复与重建过程中，狼疮性肾炎的形态学将发生变化。一项动物研究试验表明，Wnt信号通路将参与狼疮性肾炎大鼠的发病过程，大鼠的系膜细胞基质增生是其最为明显变化。Wnt信号通路升高后会诱导MMP（基质金属蛋白酶）表达，Wnt信号通路在细胞外基质的重建过程中以及狼疮性肾炎患者的发病过程中产生一定作用。在狼疮性肾炎的有关模型研究中，Wnt信号通路被激活，将激活下游基质金属蛋白酶基因。

综上所述，Wnt信号通路可能参与狼疮性肾炎的发病过程。

参考文献

[1] 孙铁霖，李里，宫亮等.Wnt信号通路在狼疮性肾炎发病过程中的作用[J].中国老年学杂志，2018，38（20）：4967-4969.

[2] 杨琳琳，程闰夏，林云等.Wnt信号通路在肾小球疾病发生发展中的作用机制研究进展[J].山东医药，2017，57（39）：107-110.

[3] 王铭浩，周淑红，许昊等.WNT信号通路在狼疮肾炎中的异常表达[J].养生保健指南，2019，12（6）：357.