食品添加剂葡萄糖醇含量的测定方法研究

赵顺新

（南京康宁司法鉴定中心，江苏南京 210000）

葡萄糖醇，又称山梨糖醇，可由葡萄糖还原而制取，作为保湿剂和界面活性剂应用广泛。日本最早允许葡萄糖醇作为食品添加剂使用，用于提高食品保湿性，或作为稠化剂使用，或可作甜味剂，制造无糖口香糖。

目前国内外研究中多采用高效液相色谱测定葡萄糖醇的含量，本研究以A公司失水葡萄糖醇溶液成品为供试品，采用高效液相色谱法测定其中的葡萄糖醇含量。

1 仪器与试药

1.1 色谱系统及色谱条件

仪器：高效液相色谱仪；色谱柱：赛分Carbomix （7.8*300mm，10μm）；检测器：示差（40℃）；流动相：纯化水；流速：0.6mL/min；柱温：55℃；进样量：20µL；稀释剂：水；

1.2 样品信息

一失水葡萄糖醇标准品，Sigma试剂，R0200Y0；葡萄糖醇标准品，Sigma试剂，G145145；失水葡萄糖醇溶液成品，A公司，20190901/20190902/20191001批。

2 物质测定方法的建立

系统适用溶液的制备：取葡萄糖醇、一失水葡萄糖醇，二失水葡萄糖醇和甘露醇适量，加水溶解并稀释成1mL含葡萄糖醇10mg、一失水葡萄糖醇4mg、二失水葡萄糖醇4mg和甘露醇1mg的溶液，作为系统适用性溶液。

供试品溶液的制备：取失水葡萄糖醇溶液样品适量，精密称定，加水溶解并制成每1mL含20mg的溶液，作为供试品溶液。

对照品溶液的制备：取葡萄糖醇、一失水葡萄糖醇适量，加水溶解并稀释成1mL含葡萄糖醇10mg、一失水葡萄糖醇4mg的溶液，作为对照品溶液。

失水葡萄糖醇溶液含量按以下公式计算：

一失水葡萄糖醇（葡萄糖醇）含量%=Cs*At/As*Ct*100

式中Cs、As分别作为对照品溶液图谱中一失水葡萄糖醇（葡萄糖醇）的浓度、峰面积。Ct和At分别作为供试品液图谱中一失水葡萄糖醇（葡萄糖醇）的浓度、峰面积。

限度：按外标法以峰面积计算，一失水葡萄糖醇不得少于15%，葡萄糖醇不得少于25%。

3 结果与讨论

3.1 线性范围

取一失水葡萄糖醇和葡萄糖醇对照品适量，加水配制成葡萄糖醇浓度20mg/mL和一失水葡萄糖醇浓度8mg/mL的标准品混合溶液。分别取标准品混合溶液适量，加水稀释至葡萄糖醇浓度分别为20、16、8、4、3.2、1.6mg/mL的溶液，一失水葡萄糖醇浓度分别为8、6.4、3.2、1.6、1.28、0.64mg/mL的溶液作为不同浓度的对照液，分别取20µL注入液相色谱仪，以浓度为横坐标，以峰面积为纵坐标进行直线回归，结果表明一失水葡萄糖醇浓度0.64～8mg/mL和葡萄糖醇浓度在1.6～20mg/mL时，峰面积与浓度线性关系良好。

3.2 进样精密度试验

对照品准备：取葡萄糖醇、一失水葡萄糖醇适量，加水溶解并稀释成1mL含葡萄糖醇10mg、一失水葡萄糖醇4mg的溶液，作为对照品溶液（20191211）。取对照品溶液，连续进样6针，对比峰面积的变化，结果表明一失水葡萄糖醇和葡萄糖醇进样的相对标准偏差RSD小于2.0%，说明测定数据间的波动性小，即本方法精密度试验符合要求。

3.3 重复性

取批号20191001失水葡萄糖醇溶液样品适量，精密称定，加水溶解并制成每1mL含20mg的溶液，作为供试品溶液平行测定6份，实验结果说明6份供试品测定的含量基本一致，RSD%为0.3%左右，该方法的重复性良好。

3.4 中间精密度试验

不同仪器测算同一批样品中一失水葡萄糖醇和葡萄糖醇含量，考察中间精密度。RSD%均不超过0.3%，实验结果说明该方法的精密度良好。

3.5 回收率试验

精密称取失水葡萄糖醇溶液（20191001）0.32g、0.40g、0.48g各3份，每份称3次，共称9份，用纯化水定容至20ml。取供试品溶液20µL，注入液相色谱仪，按外标法计算含量，计算RSD%均在0.5%左右。实验结果表明该方法测定失水葡萄糖醇溶液含量，回收率良好。

3.6 耐用性试验

取20191001批失水葡萄糖醇溶液样品适量，加水溶解配制成浓度为20mg/mL的供试品溶液。选用赛分的不同编号的Ca-NP柱，按照测定方法进行测定，实验结果表明本方法在同一型号不同批号的色谱柱上可以得到重现，有较好的耐用性。

3.7 专属性和系统适用试验

3.7.1 系统适用性

取葡萄糖醇、一失水葡萄糖醇，二失水葡萄糖醇和甘露醇适量，加水溶解并稀释成1mL含葡萄糖醇10mg、一失水葡萄糖醇4mg、二失水葡萄糖醇4mg和甘露醇1mg的溶液，作为系统适用性溶液。进样1针，主峰的RSD小于2.0%，三个峰之间的分离度符合要求，实验结果表明该色谱条件下系统适用。

3.7.2 专属性

取失水葡萄糖醇溶液供试品适量，加水溶解成20mg/mL的溶液，作为未破坏样品；取本品400mg，置20mL量瓶中，加适量水使溶解，加入3%双氧水1mL，25℃放置60min，取出，加水稀释至刻度，作为氧化破坏样品；取本品400mg，置20ml量瓶中，加适量水使溶解，加入1mol/L盐酸1mL，25℃放置60min，取出，加1mol/L氢氧化钠溶液1mL中和，加水稀释至刻度，作为酸破坏样品；取本品400mg，置20mL量瓶中，加适量水使溶解，加入1mol/L氢氧化钠1mL，25℃放置60min，取出，加入1mol/L盐酸中和，加水稀释至刻度，作为碱破坏样品；取本品置于80℃放置1h，取出，按照供试品配制方法配制，作为高温破坏样品；取上述未破坏供试品和破坏供试品20µl，注入液相色谱仪，考察降解杂质峰，并计算失水葡萄糖醇溶液含量，实验结果说明该色谱条件下，无降解杂质产生，样品经破坏后与未破坏的含量基本一致，破坏对结果无干扰，本法专属性良好。

3.8 样品中含量检测结果

对样品进行含量检测，实验结果说明三批失水葡萄糖醇溶液的一失水葡萄糖醇和葡萄糖醇含量符合规定，为合格品（如表1）。

表1 失水葡萄糖醇溶液样品测定结果

4 结论

通过对供试品中葡萄糖醇的含量进行分析，本文所述分析方法得到多批次检测结果，数据准确可靠。本检测方法在含量的测定中的专属性、定量限、适应性、线性、重复性、精密度、回收率等在所用色谱设备上均表现出较好水平。