喷雾免疫的原理及其影响因素

汪树文，稽红岗

（乾元浩生物股份有限公司 北京 100071；乾元浩生物股份有限公司南京生物药厂 南京 210000）

随着家禽养殖集约化、规模化的发展，疾病防控风险和人工免疫压力越来越大，省时省力的喷雾免疫方法逐渐被人们接受。目前孵化场的一日龄喷雾免疫已经被广泛采纳，但在实际操作过程中还有很多忽视的问题，由于操作不当造成的免疫副反应比比皆是，本文就喷雾免疫的原理、优点以及影响免疫的因素做了总结，期待能提高广大从业者一日龄喷雾免疫的成功率。

1 喷雾免疫原理

喷雾免疫是通过气缸压力将大量含有疫苗的雾滴喷洒到鸡只的鼻腔、眼睛、口腔内，使疫苗达到鸡的靶细胞，从而诱导免疫应答。喷雾免疫不仅可以使部分活疫苗到达鸡只呼吸道黏膜，产生黏膜免疫和细胞免疫，还能被吞噬细胞吞噬后转运到淋巴器官或血液，进入网状内皮系统产生体液免疫。喷雾免疫是目前养禽业重要的免疫方法，多应用于新城疫（ND）、传染性支气管炎（IB）、球虫等疫苗的群体防疫。

2 喷雾免疫的优点

2.1 产生免疫保护快

喷雾免疫，就是模拟病毒自然感染途径，让鸡只吸入经过雾化的活病毒，诱导机体产生免疫反应。通常，喷雾免疫后第3 天开始产生局部免疫保护，饮水免疫第7 天开始产生免疫保护，滴鼻、点眼从第5 天开始产生局部免疫保护，由此可见，喷雾免疫能够较早地产生局部黏膜免疫。对于养殖环境较恶劣的养殖场，孵化场的一日龄喷雾为雏鸡提供了较早的免疫保护，降低了雏鸡早期感染的发生概率，尤其对于目前严重影响养禽业的传染性支气管炎（IB），早期的防疫降低了养殖过程中因早期感染造成的“假母鸡”的发生概率。

2.2 免疫减负，提高效率

相比传统的滴鼻、点眼免疫，喷雾免疫避免了将鸡群驱赶到一起、逐只抓取的免疫过程，避免了由传统免疫造成的驱赶、拥挤等较大的免疫应激，传统滴鼻点眼工作效率低，熟练工人每小时可完成1,000 只左右鸡群的滴鼻点眼工作，而喷雾免疫可大大提高工作效率，每小时可完成2 万～3 万只鸡的免疫工作，这样也可使疫苗稀释后存留时间短，间接减少疫苗效价的损失，达到提高免疫效果的目的。

3 影响免疫效果的因素

3.1 雾滴大小及一致性

众所周知，疫苗都有其特定的靶器官，喷雾过程中雾滴的大小、喷雾分布的类型等都会影响疫苗达到的位置（表1），从而影响免疫的效果。雾滴喷出时的大小取决于压力和喷嘴，但因雾滴间撞击和降落时的蒸发作用，实际雾滴到达鸡只鼻腔等位置时会大大减小。

我们在使用NDV/IBV 等具有呼吸道嗜性的疫苗时，应避免使用较小的雾滴，因为这些雾滴不是被蒸发掉，就是形成过小的雾滴到达呼吸道深部，造成免疫副反应。同样，雾滴过大会造成这类雾滴直接落到地上。理想的情况是喷嘴喷出的雾滴大小均匀、直径约为120～170μm，这样离喷头20cm 的鸡群可获得3μm 左右的疫苗的雾滴。

表1 雾滴大小与到达位置

3.2 喷雾剂量

喷雾免疫中，喷雾剂量同样影响疫苗的使用效率。Jordan（2016）的试验数据显示：21mL 喷雾量较7mL 喷雾量，传染性支气管炎（IB）疫苗的损失减少20%，从喷头到鸡的平均滴度下降减少1个滴度，即喷雾水量大有利于减少IB 疫苗在免疫过程中的损失！这可能与IBV 疫苗的温度敏感度高有关系.

3.3 稀释液质量

目前用来作为疫苗稀释液有专用稀释液、生理盐水、纯净水、自来水等，不同稀释液对疫苗效价影响较大，商品化的专用稀释液稀释后疫苗效价最稳定，其次为纯净水，效果最差为生理盐水和自来水。生产实践中不少人使用桶装水或凉开水来稀释冻干疫苗，致使疫苗效价下降严重。对于喷雾免疫来说，使用清凉、新鲜，不含矿物质和氯的蒸馏水，是较好的选择，同时可适当添加疫苗稳定剂。稀释水温应在8～20℃，对于对温度敏感度高的IB 疫苗来说，建议水温为2～8℃。Jordan（2016）研究表明，随着时间的推移，用冷的稀释液（4℃）混合并低温保存的IBV 疫苗，滴度可以维持至少4h。当用冷的稀释液混合，但不做低温保存处理，当疫苗到室温（18℃）时，疫苗滴度开始下降，120min 内丧失滴度。当用室温（大于20℃）的稀释液混合疫苗，立即丧失1 个滴度以上。

3.4 环境条件

进行喷雾免疫时应注意：空气湿度控制在60%～70%，远离加热器，这样会最大限度降低雾滴的蒸发作用，提高疫苗的利用率；保持室内无粉尘，否则疫苗随粉尘进入呼吸道会造成雏鸡强烈的副反应，并影响免疫效果提高疫苗的利用率。孵化场喷雾后应静置15min，使沉降到雏鸡羽毛上的疫苗被雏鸡啄食，待润湿的羽毛干燥后再将盖子盖上。较早将盖子盖上，会使雏鸡箱/框内部变黑，雏鸡缩脖不活动，这时鸡群羽毛潮湿，会出现冷应激。

3.5 设备的选择与使用

选择稳定性好、雾滴大小一致性高的设备。喷雾设备要由专业的人员安装，调试，各个厂家的喷雾机的喷头与使用压力都有不同，只有达到厂家要求的压力才能喷出均匀一致、大小合适的雾滴。喷雾的剂量每次使用前校准，且应添加染色剂评估水滴的分布（鸡盒里至少90%以上鸡应染色）。每次使用完后做好清洁维护，将管道内的疫苗清除，再用蒸馏水或清水冲洗干净，然后擦拭晾干保存，堵塞的喷头可将其拆下放入醋酸中浸泡除污。