迷走神经刺激对脑缺血再灌注大鼠磷酸腺苷活化蛋白激酶-沉默信息调节因子2相关酶1自噬通路的影响

魏海萍，郭佳，王欢，葛朝明

兰州大学第二医院神经内科，甘肃兰州市 730030

脑卒中严重危害中老年人健康，但缺乏有效干预措施[1]。缺血半影区神经元自噬是缺血性脑卒中发生、发展的重要病理生理机制[2]。脑缺血发生时存在自噬[3]，自噬可减轻缺血性脑卒中神经损伤[4]，在脑缺血中发挥脑保护作用[5]，也可加重脑缺血损伤[6]。迷走神经刺激(vagus nerve stimulation,VNS)已被广泛应用于治疗各种疾病[7]，如改善抑郁小鼠症状[8]、癫痫、头痛和阿尔茨海默病等[9-11]，姜黄素联合VNS 可减轻脑缺血再灌注损伤引起的行为障碍[12]。

调控腺苷酸活化蛋白激酶(adenosine monophosphate activated protein kinase,AMPK)信号通路的自噬可改善认知障碍[13]。硒代蛋氨酸通过AMPK 激活下游哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)，从而激活皮层神经元自噬，改善阿尔茨海默病小鼠认知功能[14]。AMPK 激活需要α 亚基苏氨酸(Threonine)172 位点磷酸化，通过活化AMPK/mTOR/Unc-51 样自噬活化激酶信号通路可激活自噬[15]。

沉默信息调节因子2 相关酶1 (silent mating type information regulation 2 homolog 1,Sirt1)是一种重要的去乙酰化酶，在神经退行性疾病中保护神经元[16]。Sirt1 能与微管相关蛋白1 轻链3 (microtubule-associated protein 1 light chain 3,LC3)相互作用，在自噬泡形成阶段起重要作用。Sirt1 的活化可正向调节AMPK，AMPK-Sirt1通路与认知障碍有关[17]。

本研究探讨VNS在缺血性脑卒中大鼠缺血半影区细胞自噬中的作用及其分子机制。

1 材料与方法

1.1 实验动物及造模

成年雄性SPF 级Sprague-Dawley 大鼠56 只，由兰州大学实验动物中心提供，分为正常组(n=14)、假手术组(n=14)、模型组(n=14)和VNS 组(n=14)。后两组参照文献[18-19]线栓法阻断大脑中动脉(middle cerebral artery occlusion,MCAO) 1 h 再 灌 注。VNS 组 在 血流阻断0.5 h 时，行左侧VNS(因左侧迷走神经发出支配心脏纤维少)，实验参数和操作参照文献[20]。……