几株伪狂犬病病毒的增殖特性与保存条件

陈赛赛 郑亚婷 郭容利

摘要：高滴度的抗原是制备优质疫苗的首要条件。對6株伪狂犬病病毒在仓鼠肾（baby hamster kidney，简称BHK）细胞和猪睾丸细胞（swine testicular，简称ST）细胞上的增殖效率进行了比较，同时测定不同保存温度和冻融条件对病毒滴度的影响。结果表明，几株伪狂犬病病毒在BHK细胞和ST细胞上增殖效率均很高，可达到生产要求。相较于ST细胞，各毒株在BHK细胞上出现病变时间更早。然而，所有毒株在ST细胞上的病毒滴度都高于同期在BHK细胞上的滴度。强毒株AH02LA株在2种细胞上滴度可达108.0 TCID50/0.1 mL以上，表现为发生病变早，病毒增殖快，峰值到来早的特性。通过强毒株AH02LA株获得的基因缺失株LA-A株和自然传代缺失致弱株LA2017株峰值均达108.0 TCID50/0.1 mL，展现出优良疫苗株的潜质。保存条件试验表明，PRV在-70 ℃保存30 d和4 ℃保存12 d内滴度相对稳定，而-20 ℃保存的病毒滴度下降明显。多次冻融后，滴度有所下降，相较于-70 ℃，-20 ℃条件下冻融病毒滴度下降更为显著，建议避免多次冻融。本试验结果可为PRV疫苗抗原在实际生产中制备与保存提供科学依据。

关键词：伪狂犬病病毒;猪睾丸细胞;仓鼠肾细胞;生长特性;冻融;保存

中图分类号： S852.65+5  文献标志码： A  文章编号：1002-1302（2020）11-0148-05

收稿日期：2020-04-23

基金项目：江苏省农业科技自主创新资金[编号：CX（18）3020];江苏省自然科学基金（编号：BK20181243）。

作者简介：陈赛赛（1993—），男，山西长治人，研究实习员，主要从事猪伪狂犬病疫苗及其防控技术的研究。E-mail：1304652436@qq.com。

通信作者：王继春，男，江苏南京人，博士，研究员，主要从事活载体疫苗和基因工程疫苗研究。E-mail：jcwang@263.net。  伪狂犬病是由伪狂犬病病毒（pseudorabies virus，简称PRV）引起的以家畜发热、奇痒（猪除外）和脑脊髓炎为主要特征的烈性传染病，又称Aujeszky病[1]。……