化学发光免疫分析法、酶联免疫吸附试验在乙型肝炎病毒标志物检测中的效果评价

陈文强

淄博市周村区人民医院检验科，山东淄博 255300

病毒性乙型肝炎是一种常见的肝脏性疾病， 患者多表现为肝区疼痛，乏力和食欲不振等情况，部分患者会出现黄疸和肝功能受损等损伤，一旦发现不及时，则很容易导致患者出现肝硬化， 甚至导致肝癌问题的发生， 这种病情具有一定的传染性， 会通过血液进行传播，患者一旦被感染，如不能及时清除，则会导致患者出现免疫功能降低等情况， 甚至导致患者出现全身感染，诱发各种疾病，对患者的生命安全造成严重威胁[1]。进行血清学标志物检验， 是临床中对乙型肝炎病毒患者进行检验的主要方法， 在检测工作的实际开展过程中， 其主要包括化学发光免疫分析法和酶联免疫吸附实验法。该研究则以该院2014 年8 月—2015 年8 月期间所接受的200 例乙型肝炎病毒患者展开相关研究分析如下，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

于该院乙型肝炎病毒患者中方便选取试验对象，共选取200 例乙型肝炎病毒患者， 所有患者入院之后需要采集静脉血， 采集之后分别采取化学发光免疫分析法和酶联免疫吸附试验方法， 每种方法检测人数为100 例，实验组患者年龄在22～56 岁；其中男性54 例，女性46 例。 而对照组患者年龄在21～57 岁；其中男性56 例，女性44 例。 两组人员的一般资料差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。 该研究通过伦理委员会批准，各项工作的开展均在患者签署知情同意后进行实施。

纳入标准： 患者均在经过乙肝病毒生物芯片检测确诊为乙型肝炎病毒患者， 患者肝部组织存在不同程度病变。

排除标准： 患者具有精神病史和其他脏器功能损伤的可能性。

1.2 方法

在清晨采集患者空腹静脉血，主要采集肘静脉血，为3～5 mL，给予其离心机离心处理，时间为12～14 min，保证3 000 r/min，并将上清液进行分离，并将其放置在冰箱中，将冰箱的温度调节到-20℃给予保存，并将发光免疫分析法和酶联免疫吸附实验方法进行应用[2]。 对患者进行检查， 其中发光免疫分析法需要将型号为博阳LICA 化学发光仪的免疫分析仪进行应用， 而酶联免疫吸附实验方法则是手工方法，其对应的检测试剂均为配套试剂。 在对标志物进行实际检测时，需要根据试剂的说明书进行严格操作，并注意对检测结果进行记录[3]。

1.3 观察指标

对两种检测方法的检测准确率和血清标志物阳性率进行观察和分析。

1.4 统计方法

选用SPSS 20.0 统计学软件分析数据，计量资料以（）表示，行t 检验；计数资料以频数和百分比(%)表示，行χ2检验，P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 检测准确率

采用发光免疫分析法进行检测， 其准确率达到96.00%，采用酶联免疫吸附实验方法进行检测，其准确率为84.00%，其组间数据差异有统计学意义（χ2=8.000，P＜0.05），见表1。

表1 两种检测方法检测准确率分析比较

2.2 血清标志物阳性率

发光免疫分析法在HBsAg 和HBeAg 检测方面的阳性检测率为77.00%和35.00%，高于酶联免疫吸附实验方法检出率的60.00%和20.00%, 其数据差异有统计学意义（χ2=6.697、5.643，P＜0.05），但是发光免疫分析发在抗-HBs， 抗-HBe 和抗-HBc 方面的检出率则为19.00%，24.00%和67.00%， 而酶联免疫吸附法的检出为18.00%，28.00%和66.00%， 两种检测方法差异无统计学意义（P＞0.05）。 见表2。

3 讨论

在人们的生活方式得以发生改变的情况下， 乙型肝炎患者的发病率逐渐增高，患病人数越来越多，对患者的生活质量和生命健康均造成了严重的不良影响，在这种情况下，就需要保证早发现早治疗，从而保证治疗有效性，实现对病情发展的有效控制。 乙型肝炎，为血源性传播，会经血液和母婴进行，根据相关文献研究数据结果显示， 在乙肝病毒携带者的精液和阴道分泌物中，均能够检出HBsAg，这便为乙肝病毒的侵入提供了条件。 也就是说， 梅毒患者既是乙肝病毒的高危人群，也是易感人群。 就病毒性乙型肝炎来说，其是一种常见的肝脏性疾病，患者多表现为肝区疼痛，乏力和食欲不振等情况， 部分患者会出现黄疸和肝功能受损等损伤， 一旦发现不及时， 则很容易导致患者出现肝硬化，甚至导致肝癌问题的发生，这种病情具有一定的传染性，会通过血液进行传播，患者一旦被感染，如不能及时清除，则会导致患者出现免疫功能降低等情况，甚至导致患者出现全身心感染，诱发各种疾病，对患者的生命安全造成严重威胁。 进行血清学标志物检验，是临床中对乙型肝炎病毒患者进行检验的主要方法， 在检测工作的实际开展过程中， 其主要包括化学发光免疫及分析法和酶联免疫吸附实验法[5]。 在将传统诊断方法进行应用时，其结果并不显著，会对患者的治疗造成延误。 要想将治疗率进行提高，保证治疗方案合理性，实现对患者病情的有效控制，减轻患者痛苦，就成为了当前临床发展工作中的重要内容。 在近些年的发展中，发光免疫分析法和酶联免疫吸附法被广泛应用在对乙型病毒性肝炎进行诊断工作中，并且其应用效果显著。

表2 两种检测方法的血清标志物阳性率检测情况对比[n(%)]

酶联免疫吸附法在进行检测时， 其应用原理需要从几方面入手，首先，促进某种酶与抗原或抗体进行连接，促进其中酶标抗体和抗原的形成，这时所产生的形成物主要包含两种成分， 分别为酶活性和免疫活性[6]。其次，在固相载体表面抗体或是抗原完成结合时，其会促进免疫活性的有效保存。 酶联免疫吸附法在进行应用时，具有一定的临床优势，不仅操作方法较为简单，而且其成本较低， 但是在实际中其会受到各种因素的影响限制，导致其具有一定的特异性反应，导致结果呈现出不稳定性，就浓度过高的待检产物来说，其会在钩状效应的作用下， 导致假阴性结果的出现，甚至发生漏检情况。 酶联免疫吸附法的判断结果，主要是依据酶显色的颜色深浅实现判断， 在酶与抗原和抗体的结合物浓度较低时，会表现出较小的吸光度值，并且容易导致假阴性现象的发生，与此同时，这种检测方法的应用存在一定的局限性， 很容易导致HBsAg 假阴性漏检现象的发生[7]。

发光免疫分析法，是一种新型的检测方法，主要应用电化学发光和免疫测定促进结合，在实际应用中，其会对电化学发生作用，会在电极表面引发化学反应，进而将其进行利用，完成免疫检测，这是发光免疫分析法的主要应用原理。 发光免疫分析法的应用灵敏度较高，仅需要较短的检测时间，并且应用范围相对较广，对应的检测准确率较高， 因此， 在临床发展中得以广泛认可。HBsAg，抗-HBs，HBeAg，抗-HBe，和抗-HBc 是临床对病毒性乙型肝炎进行诊断的主要物质[8]。

采用发光免疫分析法进行检测， 其准确率达到96.00%，采用酶联免疫吸附实验方法进行检测，其准确率为84.00%， 发光免疫分析法在HBsAg 和HBeAg 检测方面的检测值高于酶联免疫吸附实验方法， 其数据差异有统计学意义（P＜0.05），但是在抗-HBs，抗-HBe和抗-HBc 方面的检测值，两种检测方法差异无统计学意义（P＞0.05）。这与Ceejay L 等人[9]的研究结果相同，其选取50 例乙型肝炎患者进行研究，探究发光免疫分析法的监测准确性，其检测准确率达到94.00%。 而丛青洲[7]则进行了不同方法和实验室间血清HBsAg、HBeAg 及HBV-DNA 检测结果的比较分析， 共选取60 例乙型肝炎患者，其方法分别为发光免疫法和酶联免疫吸附法，结果表示，各项化学检测结果差异无统计学意义（P＞0.05）。而该研究结果则显示， 发光免疫分析法在HBsAg 和HBeAg 检测方面的检测值高于酶联免疫吸附实验方法， 导致这种情况发生的原因可能是因为样本数大小不同，进而对结果造成差异性影响。

开展病毒性乙型肝炎的情况分析， 这是一种较为常见的肝脏类型性疾病， 患者会因此病表现出肝区疼痛现象，并且伴随着相应的食欲不振，部分病情较为严重的患者会出现肝功能受损问题。 此类疾病若发现的不及时，会使得病情恶化导致患者肝硬化，甚至病变成为肝癌严重的威胁了患者的生命健康安全， 同时此类疾病的传染性相对较高，因此患者若是被感染，必须进行其自身的病毒的即使清除， 杜绝患者全身心感染问题的出现，同时也避免了各项诱发性疾病的产生，尽可能的降低疾病对于患者的生命健康的威胁。 在检测工作开展的实际进程中， 主要应用化学发光免疫以及分析法进行实验[9]。 当下ELISA 在临床治疗开展进程中的运用， 在初期检测乙肝病毒血清药理的主要运行方式之一，这一操作方法相对较为简单，并且实验结果的勘察具有较强的明确性和标志性， 但是在检验工作的开展进程中， 需要进行因抗体产生而形成的检测误差的有效排查， 尽可能的降低抗体产生对于实验结果的产生的不良影响性。

综上所述，对乙型肝炎病毒标志物进行检测，发光免疫分析法和酶联免疫吸附实验法的准确率均相对较高，但是发光免疫分析法更为显著。