驴消化道部分生理指标的测定

葛祥启

（临沂市河东区畜牧发展促进中心，山东临沂 276034）

本试验所研究驴消化道的结构是指食管末端至肛门这一段消化道，可大致分为胃部、小肠、大肠。育肥驴饲料的消化吸收主要在肠管进行，育肥驴的盲肠很大，其中含有大量的肠道微生物，便于分解粗纤维。食糜中易消化物质会先被小肠接收，消化不完全的物质，则进入大肠。盲肠上与回肠连接的回盲口，下与结肠连接的盲结口都很细，从小肠来的食糜，在其中混杂和驻留，由盲肠中的大量微生物进行进一步分化。育肥驴的大结肠位居盲肠和小结肠间，直径约为30cm，容量约50L。其中含有的细菌也可分解纤维素。空肠常见的疾病有肠道阻塞，但是兽医临床对驴肠道疾病的研究不多，常研究于胃病的预防上面。

1 材料和方法

1.1 试验材料

1.1.1 试验动物

本地健康育肥驴一头，10月龄。

1.1.2 主要试剂

缓冲溶液，碳酸钠溶液，三氯乙酸溶液，酪蛋白溶液，L-酪氨酸标准液。

1.1.3 主要仪器设备

pHS-3C数显型酸度计，电子天平，恒温水浴箱，分光光度计。

1.2 试验方法

1.2.1 试验材料的处理

取新鲜驴肠，去除血污辨认好胃肠道各部位，用解剖剪在各部位剪开小口，伸入无针头的50ml注射器抽取胃肠道食糜液40ml，每个部位选取等距离的3个点。

1.2.2 pH 值的测定

试验操作：向准备好的小烧杯中分别注入10ml食糜液，按 1：10加入蒸馏水稀释，同时用玻璃棒搅拌均匀，形成匀浆，再用pH计进行测量，用高精度pH试纸进行对比。

1.2.3 蛋白酶的测定

标准曲线绘制：以吸光度为纵坐标，酪氨酸浓度为横坐标，绘制标准曲线。

样品测定：取待测样品酶液 1.00ml置于40±0.2℃恒温水浴箱中预热，加酪素1.00ml，恒温水浴加热10min，再加三氯乙酸2.00ml，摇匀，拿出静置10min，过滤，取1.00ml滤液，按制作标准曲线的步骤作相同的处理。

1.2.4 淀粉酶的测定（碘-淀粉比色法）

用注射器向事先准备好的干净烧杯中注射10ml食糜液，加入PBS或生理盐水以保持酶的活性，再用多层纱布过滤后获得10ml肠道内容物上清液。随后取2支试管，一支为测定管，一支为空白管。分别在测定管和空白管中加入0.5ml底物缓冲液，37℃水浴加热，向测定管中加入待测样本0.1ml，混匀，37℃水浴加热，随即分别向测定管和空白管中添加碘液0.5ml，然后分别向测定管和空白管中添加双蒸水3.0ml和3.1ml。混匀，将试管中的溶液倒入比色皿中。设置分光光度计的波长为660nm，光径为1cm，用双蒸水调零后，测定各管吸光度。

2 结果与分析

2.1 试验结果

试验测得驴消化道内的数据为：pH值：胃2.92、十二指肠5.19、空肠5.78、回肠5.83、盲肠7.22、结肠6.41、直肠6.22，蛋白酶活性：十二指肠 56.36 u/g、空肠 23.47 u/g、回肠 25.73 u/g，淀粉酶活性：十二指肠 154.74 u/g、空肠 138.61 u/g、回肠 110.32 u/g。

2.2 试验结果分析

需要测定的生理指标在十二指肠、空肠和回肠中最具代表性，pH环境由食物、胃液、胰液、胆汁和小肠液提供，蛋白酶由胃液中的胃蛋白酶、胰液中的胰蛋白酶提供，淀粉酶由胰液中的淀粉分解酶和小肠液中的肠淀粉酶提供。通过试验数据可得出pH值在胃部的数值最小，为强酸性，随后酸性减弱，pH值依次增大；蛋白酶和淀粉酶在十二指肠中的活性最大，其中的酶大部分由胰腺提供。

3 讨论

驴是马属动物，不是反刍动物，反刍动物的胃是单室胃。近年来肠道疾病在临床上的发病率和死亡率逐步上升，导致驴、马和猪等相关动物受疾病损失严重。本试验通过应用pH计测量胃肠道食糜液的pH值在理论上可以反应出胃肠道pH值、胃肠道微生物等指标的变化，测定淀粉酶和蛋白酶地活性则能反映驴的身体状态，从而更好的弥补这一领域的不足。

本试验方法为驴场的实际检测提供了试验操作的参考，给出驴消化道内部分生理指标的正常范围，可以为马属动物消化道疾病的预防和诊治提供帮助。用此方法检测消化道操作简单，方便快捷，成本低，适合推广使用。过去驴的养殖方式是粗放，饲料以草为主，现在养殖场里的驴更多的以饲料为食，饮食结构发生较大改变，胃肠道的内环境也发生了相应的变化，测出的数据对治疗和预防驴乃至马属动物的胃肠道疾病具有重要意义，可以帮助养殖业及其相关产业降低经济损失，此即为本试验最大的价值所在。