玉米农杆菌转化方法

司 冰

（河南省种子管理站，河南 郑州 450046）

玉米作为世界上主要的粮食作物和工业原料之一，推动其转基因技术研究与应用，是进行玉米功能基因组研究的有效方法，同时对确保国家粮食安全有重要意义。当前全球商业化的转基因植物有107 种，其中，作为主流方法的农杆菌转化和基因枪转化分别占到了64%和31%，而利用DNA 直接转移法和电激法的仅有5%[1]。农杆菌介导法在玉米遗传转化方面占有很大的优势，单拷贝数、基因沉默比较少、性价比高等。

1 根癌农杆菌

根癌农杆菌是生活在植物根的表面依靠由根组织渗透出来的营养物质生存的一类普遍存在于土壤中的革兰氏阴性细菌，是一种天然的基因转化系统。它以双子叶植物为天然宿主，双子叶植物中的遗传转化已经取得了非常好的进展，但是对于玉米这样的单子叶植物来说，遗传转化就没有那么容易了，其遗传转化研究相对双子叶植物落后。

根癌农杆菌携带有Ti 质粒，可以诱发植物产生冠瘿瘤，而T-DNA 是根癌农杆菌Ti 质粒上的一段DNA序列,可以转移并稳定整合到植物核基因组中。外源基因就是整合到T-DNA 上，通过T-DNA 的转移整合到植物基因组中。Ti 质粒因为上述优点成为了导入外源基因的有效载体。农杆菌介导的遗传转化方面的研究已经日臻完善，发展成了植物基因工程中不可缺少的工具。因此，农杆菌被称为自然界中的“天然遗传工程师”[2]。目前，在玉米遗传转化中使用的农杆菌有3 种类型，不同的类型毒性不同，应根据受体的不同选择不同的菌株，产生不同的转化效率。……