消退素E1对氧化应激下人牙髓干细胞生物学性能的影响

杨 婷，陶 硕，张 旗

活髓保存是临床上牙体牙髓病治疗的首要目标，主要通过促进牙本桥形成，隔绝外界刺激，进而使牙齿继续行使其各项生理功能[1]，牙髓的自我损伤修复能力是其生物学基础。但最新研究表明[2-3]，糖尿病可以引起牙髓组织损伤修复受损，在糖尿病大鼠直接盖髓实验中，成功率仅有53.8%，临床研究1年成功率仅有38.2%，这主要是由于糖尿病的氧化应激病理状态导致牙髓干细胞发生氧化损伤[4-5]，增殖、分化等生物学性能减弱，而牙髓组织损伤的成功修复主要依赖于牙髓干细胞增殖、迁移和分化这些生物学性能的有效发挥[6]。

消退素E1(resolvin E1,RvE1)是近年来广泛研究的内源性脂质介质，由ω-3多不饱和脂肪酸衍生而来[7]，可以通过促进过氧化物的清除和减少自由基的形成来发挥抗氧化作用[8-9]，同时其还具有抗炎促消退、促进成骨、缓解疼痛、抗纤维化等生物学作用[10-12]。但RvE1能否对氧化应激下人牙髓干细胞(human dental pulp stem cells, hDPSCs)的生物学性能起保护作用仍不清楚，因此本研究旨在探索RvE1对氧化应激损伤的hDPSCs形态、增殖、迁移及成牙向分化这些生物学性能的影响。

1 材料与方法

1.1 主要试剂

α-MEM培养基、青霉素/链霉素双抗、PBS、0.25%胰蛋白酶(Hyclone，美国)，胎牛血清(Excell Bio，澳大利亚)，Ⅰ型胶原酶、分散酶、DAPI、地塞米松、β-甘油磷酸钠、抗环血酸(Sigma，美国)，RvE1(Cayman Chemical，美国)，ChemR23抗体(Abcam，美国)，HE染色试剂盒(威奥生物科技有限公司，上海)，鬼笔环肽(Invitrogen，美国)，4%多聚甲醛(PFA)(联超生物科技有限公司，上海)，cck-8检测试剂盒(同仁，日本)，3%过氧化氢、碱性磷酸酶(ALP)检测试剂盒(青牧生物科技有限公司，上海)。……