姜黄素通过下调microRNA-125b 保护人视网膜色素上皮细胞免受高糖诱导的细胞损伤

苏军华焦永伟魏宏莲

(1.河北医科大学第二医院检验科,石家庄 050000; 2.河北省中医院骨科,石家庄 050000)

糖尿病是一种慢性代谢性疾病,全球约有4.15亿糖尿病患者,而亚洲患病人数约超过2.3 亿,且呈逐年上升趋势,严重危害患者身心健康及生活质量[1]。 糖尿病长期进展可损害眼、肾、神经、血管等多种组织并引起严重并发症[2]。 人视网膜色素上皮(retinal pigment epithelium,RPE)细胞是视网膜细胞重要营养及代谢组织,糖尿病患者长期处于高糖环境下,易使RPE 细胞因高糖刺激机体产生过多氧自由基造成氧化应激损伤,从而导致多种视网膜病变[3]。 糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy,DR)是糖尿病常见眼部微血管并发症之一,是导致患者视力损伤甚至失明的重要原因[4-5]。 姜黄素是一种酚性色素,存在于姜黄、郁金、莪术等中药的根茎中,具有抗氧化[6]、抗肿瘤[7]、降血糖[8]等多种药理活性,但关于其对DR 的影响鲜有报道。 miR-125b是miR-125 家族中一员,其异常表达与糖尿病[9]及其胰岛素抵抗[10]等密切相关,是糖尿病治疗的新型靶点分子。 因此通过高葡萄糖糖浓度建立高糖环境,拟探究姜黄素对高糖诱导人ARPE-19 细胞损伤的作用及miR-125b 表达的影响,以期揭示其作用机制,为临床应用提供一定参考。

1 材料和方法

1.1 实验细胞

ARPE-19 细胞(目录号:CC-Y1051)购自美国ATCC 公司。

1.2 主要试剂与仪器

DMEM/F-12 培养基(批号:12634010)、胎牛血清(FBS,批号:10099141)均购自美国Gibco 公司;PrimeScriptTMII 1st Strand cDNA Synthesis Kit(批号:6210A)、Mir-X miRNA qRT-PCR SYBR Kit(批号:638314)均购自大连TaKaRa 生物技术有限公司;引物及 miR-125b 抑制物( inhibitor)/阴性对照(negative control,NC)由上海生工生物工程股份有限公司合成;SOD 酶联免疫吸附实验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA) 试剂盒(批号:69 -21389)购自武汉默沙克生物科技有限公司;MTT 试剂盒(批号:C0009)、Annexin V-FITC/PI 细胞凋亡检测试剂盒(批号:C1062S)购自上海碧云天有限公司。……