刘金泉 张继红 刘春云 纪宁 孙永胜
抑郁症是一种表现为抑郁心境的情感障碍疾病,对患者身心带来极大负面影响,具有极高的社会危险性[1]。据统计预测,抑郁症将成为世界第二大导致人类死亡或伤残的疾病,仅次于冠心病[2]。研究表明,抑郁症患者在缓解和复发期间,其认知功能仍处于持续下降状态,严重阻碍其社会功能的恢复[3]。文献报道,抑郁障碍伴随着miRNA表达的紊乱,miRNA可介导神经细胞的生长、分化、凋亡等过程,参与抑郁症的发生发展[4-5]。作者所在课题组前期研究发现,miR-370-3p在抑郁症大鼠下丘脑组织中表达明显下调,提示miR-370-3p可能参与抑郁症的发生,但miR-370-3p在抑郁症发生发展中的具体调控机制尚不清楚。本研究旨在观察miR-370-3p对抑郁症大鼠抑郁样行为和神经元损伤的影响,并初步分析其靶基因。
1.1 实验动物清洁级雄性SD大鼠60只,周龄6~8周,体重180~220 g,购自湖南斯莱克景达实验动物有限公司,动物许可证号:SCXK(湘)2019-0001,适应性喂养1周后进行实验,相关实验操作均遵守《实验动物管理条例》[6]的相关规定。
1.2 主要试剂与仪器人胚肾细胞293T(美国ATCC,ZY-H010)为上皮样贴壁细胞,观察箱购自华安医学股份有限公司,高架十字迷宫购自北京拜安吉科技有限公司,动物行为学视频分析系统为上海然哲仪器设备有限公司产品,miRNA激动剂无意义序列(NC agomiR)和miR-370-3p miRNA激动剂(miR-370-3p agomiR)购自江苏百奥生物技术有限公司,miR-370-3p相似物(miR-370-3p mimic)、相似物无意义序列(NC mimic)、空载病毒(Ad)、RUNX1腺病毒(Ad-RUNX1)及引物合成购自上海柏业贸易有限公司,双荧光素酶报告试剂盒为武汉纯度生物科技有限公司产品,RUNX1蛋白一抗购自美国Cell Signaling Technology公司。……