墓头回提取物对急性髓系白血病完全缓解期患者骨髓源性树突状细胞功能的影响

王玉虹 夏小军 崔 杰 姜俊峰 段 赟

甘肃省肿瘤医院血液肿瘤科，甘肃兰州 730050

微小残留病灶（minor residual disease，MRD）是导致白血病复发的根本原因，而免疫疗法已成为清除白血病微小病变的主要手段之一。白血病（leukemia）在获得完全缓解后进行免疫治疗可提高疗效[1]。树突状细胞（dendritic cell，DC）是功能最强的抗原提呈细胞，在急性髓系白血病（acute myeloid leukemia，AML）的发生过程中，其可弥补AML 细胞的缺陷，产生抗AML特异性的细胞毒性T 淋巴细胞。一些中药作为免疫调节剂，能够促进DC 的成熟，提高其抗肿瘤活性[2]。中药墓头回（Mutouhui，MTH）具有清热解毒、消痈散结之功效，可用于治疗肠道肿瘤、白血病等[3-5]，但MTH免疫治疗白血病的作用机制还不清楚。因此，本研究将MTH 提取物体外作用于AML患者来源的DC，探讨MTH 对促DC 成熟及功能的机制，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

收集2016～2018年甘肃省肿瘤医院血液肿瘤科的15例AML 完全缓解患者，其中男8例，女7例；中位年龄29（15，43）岁；3例M2a，2例M2b，3例M3，1例M4，5例M5，1例M6。研究对象均签署知情同意书，研究程序报甘肃省肿瘤医院医学伦理委员会审查批准。

1.2 骨髓单个核细胞的分离

抽取AML 完全缓解患者的骨髓10～20 mL（40 U/mL肝素抗凝），使用Ficoll 淋巴细胞分离液（美国Sigma公司）梯度离心法分离骨髓单核细胞（bone marrow monocytes，BMC），收集BMC 于10 mL 离心管中，离心弃上清，加入含10%灭活胎牛血清（杭州四季青生物制品公司）的RPMI1640 完全培养基（美国Gibco 公司）重悬细胞，调整密度浓度为5×106/mL。

1.3 树突细胞的培养与MTH 的成熟诱导

将BMC 加入培养瓶中，置于37℃、5%二氧化碳培养箱培养3 h，加入含1000 U/mL 集落刺激因子（colony stimulating factor，CSF）和500 U/mL rh IL-4的RPMI1640 完全培养基继续培养，隔日半量换液。……