通络类中药提取物对肺炎支原体感染A549细胞干预作用的研究

姜永红，吕佳佳，赵晓阳

(上海中医药大学附属龙华医院，上海 200032)

肺炎支原体(MP)为引起儿童肺炎的常见病原体，因其易产生重症、多系统并发症及抗生素广泛耐药，成为临床治疗的难点。儿童支原体肺炎归属于中医学中“肺炎喘嗽”“咳嗽”“风温”等证的范畴，其中医病机主要为肺络痹阻，因外感温热毒邪入肺络，导致肺气郁闭，血行迟滞、络脉失养，进一步加重热毒、痰湿、血瘀，三者互结阻于络中，络脉长期滞塞不通易导致络脉气血阴阳损伤，形成虚实夹杂之证[1]。针对肺络痹阻的病机，治疗大法在于通络，通络之法包括通络、宣络、清络、透络、补络、和络、活络、搜络等二十余种。虎杖、半枝莲、蝉蜕是上海龙华医院徐氏儿科治疗儿童支原体肺炎的常用通络类中药，收效良好。本实验旨在研究虎杖、半枝莲、蝉蜕及其药对和小复方的提取物体外抗MP的能力，为临床治疗筛选新的治疗药物及研究中药治疗支原体肺炎的作用机制提供更多依据。

1 实验材料和方法

1.1中药 虎杖、半枝莲、蝉蜕中药饮片购于上海康桥中药饮片有限公司(160721)。

1.2菌株及细胞 肺炎支原体国际标准株MPFH(美国ATCC,15531)，A549细胞由龙华医院肿瘤研究所馈赠。

1.3试剂及仪器 支原体肉汤基础CM403、支原体添加剂-G SR0059(BD,255420)，酚红(Sigma,M5655)，FBS(GIBCO,16000-044)，RMPI-1640(Hyclone,SH30809.01B)，青链霉素(Solarbio,P1400-100)，0.25%胰蛋白酶EDTA消化液(Solarbio,T1300-100)，白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、核因子kappa B(NF-κB)ELISA试剂盒(武汉基因美,DRE10038/DRE10291/XY-E10083)，DMSO、甘油、液体石蜡购于上海百图生物有限公司；旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器,RE-52AA)，酶标仪(北京普朗新技术公司,DNM-9602)，低温高速离心机(Eppendorf,5810R)，生物安全柜(Heal Force,HF1200A2)，二氧化碳培养箱(Thermo Fisher,Thermo Forma 3111)。……