WDR5在大鼠肾脏缺血再灌注损伤中的作用及机制研究*

张 伍 刘修恒 王 磊

肾缺血再灌注损伤(Renal Ischemia-reperfusion Injury)是指肾脏缺血恢复血流灌注后，肾功能无法恢复、甚至损伤进一步加重的现象[1]。肾脏缺血再灌注损伤通常继发于各种类型的出血性休克，此外，急性肾动脉阻塞、肾脏移植术、肾部分切术或某些全身性疾病手术，也会引起肾脏缺血再灌注损伤发生[2]。WDR5基因为编码WD-重复蛋白家族的成员，由40个左右的氨基酸残基组成,具有保守的GH(甘氨酸和组氨酸)和WD(色氨酸和天冬氨酸)序列。该家族成员参与各种细胞过程，包括细胞周期进程，信号转导，细胞凋亡和基因调控。关于WDR5在肾脏缺血再灌注损伤中的相关作用，目前尚缺乏相关文献报道。本实验选用的WDR5-0103抑制WDR5蛋白在细胞内功能的表达，通过大鼠肾脏缺血再灌注损伤模型，探讨WDR5在大鼠肾脏缺血再灌注损伤中对细胞凋亡和炎性反应中的影响，以期为临床上肾脏缺血再灌注损伤提供新的治疗靶点。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1动物：48只成年雄性SD大鼠(200-220g)由武汉大学实验动物中心提供。 维持室温25℃，相对湿度65%-70%，日光黑夜周期各12h(光照时间为8∶00-20∶00)，分笼饲养，自由进食进水，饲养2周后开始进行实验。本项目得到武汉大学实验动物委员会的批准，所有程序均符合《实验动物的护理和使用指南》。

1.1.2药物、试剂和仪器：WDR5抑制剂(WD-Repeat Protein 5-0103，批号S218401)购自美国Selleck公司，Toll样受体4 (TLR4)抗体(批号ab22048)、核因子κB(NF-κB)抗体(批号ab16502)、WDR5抗体(批号ab22512)购自于美国ABCAM公司，DMSO(二甲基亚砜,批号RNBF2134)购自美国SIGMA公司，实验时采用双蒸水配置为2%浓度溶液备用；β-actin及二抗购由中国博斯特生物技术公司设计并合成，血尿素氮(BUN)检测试剂盒(批号C013-2-1)和血清肌酐(Cr)检测试剂盒(批号C011-2-1)购自中国南京建成生物公司。……