产α-环糊精葡萄糖基转移酶的菌株筛选、鉴定与酶学性质的初步研究

陶大炜，宁喜斌,2,3,4*

1(上海海洋大学 食品学院，上海，201306)2(上海水产品加工及贮藏工程技术研究中心，上海，201306)3(农业部水产品贮藏保鲜质量安全风险评估试验室(上海)，上海，201306)4(国家淡水水产品加工技术研发分中心(上海)，上海，201306)

环糊精 (cyclodextrin，CD)通常由6个以上D-吡喃葡萄糖基通过α-1,4-糖苷键相连而成的，由于葡萄糖基个数的不同，又被分为α-CD、β-CD和γ-CD这3种，它们是应用最广泛的环糊精，也称基础环糊精，其中α-CD有6个葡萄糖基，β-CD有7个，而γ-CD有8个[1]。环糊精分子结构的外面部分具有亲水的特点，因为含有亲水基团，分子结构的内部相对就是疏水的，正因为其分子结构特殊，从而可以包络不同化合物，以改变它们物理和化学等性质，因此环糊精可以被广泛并且有效的利用，并运用于如食品工业、化妆品、药品、环保、化学分析与检测等诸多领域里[2-5]。

环糊精葡萄糖基转移酶(cyclodextrin glycosyltransferase，CGTase)可作用于淀粉等，使底物的葡萄糖基团发生转移，从而获得环糊精。CGTase可以催化4种不同的反应：歧化反应、环化反应、偶合反应和水解反应(其中前3种为3种转糖基反应)[6]。在工业应用中，主要是利用CGTase的环化反应作用，与淀粉等发生反应后生产环糊精。

目前大致可归纳为筛选产酶野生菌株进行发酵生产、结合基因库对产酶菌株的基因进行克隆表达、使用蛋白质工程技术对已知的基因片段进行改良这3种方法获取CGTase，其中产酶野生菌株的筛选是直接有效的，同时也是其他方法的基础[7]。在自然界中有很多菌株可生产CGTase，它们的分布很广泛，既存在于火山、沙石、温泉、油井等[8-11]环境，还存在于富含淀粉土壤的玉米、薯类、土豆、南瓜、甘蔗等[12]的种植地，同时这些野生菌株的种类众多。……