不同产地牡丹叶中总黄酮的含量测定

牛晓方，高一军，怀宝刚，尹二彦，马腾洲，李克明，黄利敏，王 培，侯明超，姜伟洲

（1菏泽市立医院，山东 菏泽 274031；2平邑县中医医院，山东 平邑273300；3山东省中医药研究院，山东 济南250014；4潍坊市中医医院，山东 潍坊 261041）

牡丹（Paeonia suffruticosa Andr.），中药称之为“牡丹皮”，具有清热凉血，活血化瘀的功效，是一味临床常用的中药材，其中黄酮类成分含量相对较高，其具有抗病毒、抗氧化及抗疲劳、抗癌和预防骨质疏松等作用[1-3]。本文采用醇提法测定6 个不同产地的牡丹叶总黄酮含量，以期为不同产地牡丹叶中黄酮类成分研究提供参考。

1 材料和方法

1.1 材料U-1800 型紫外分光光度计（日本Hitachi公司）；SB25-12DTDN 超声清洗机（宁波新芝科技股份有限公司）；Metter Toledo EL2401 电子天平（瑞士梅特勒-托利多公司）。牡丹叶(产地分别为1号地山东菏泽、2 号地山西运城、3 号地甘肃武威、4 号地安徽亳州、5 号地四川垫江、6 号地安徽铜陵；芦丁对照品（中国食品药品检定研究所，批号B20771，纯度98%以上）；亚硝酸钠、无水乙醇、氢氧化钠等试剂均为分析纯。

1.2 方法（1）黄酮测定方法：芦丁与Al3+产生黄色络合物，在NaNO2的碱性溶液中呈现橙红色，在波长400～600 nm 有一最大吸收波长。根据朗伯比尔定律，当波长和强度一定的入射光通过光程长度固定的有色溶液时，吸光度A 和物质浓度C 呈正比，计算浓度。（2）对照品溶液的制备：精密称取芦丁对照品5 mg，置10 mL 容量瓶中，加60%乙醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即制成浓度为500 μg/mL 的芦丁对照品溶液。（3）样品的制备：取不同产地牡丹叶样品，粉碎后称约1g，置100mL锥形瓶中，加入60%乙醇30 mL，密塞，称定重量，80℃水浴加热处理2 h，放冷后再称定重量，滤过，用60%乙醇定容至100 mL。……