三七总皂苷经miR-24 靶向C-myc 对骨关节炎模型大鼠软骨细胞凋亡与增殖的影响

陈伟达 石 玮 杨继国 陈 腾

骨关节炎是骨科临床常见病，严重影响患者生活质量[1]。微小核糖核酸（miRs）是小的非蛋白质编码RNA，其与靶mRNA 的30 个非翻译区（UTR）结合并且被认为是新的基因表达调节剂。作为血管内皮细胞中发现的缺氧敏感性miR，微小核糖核酸-24（miR-24）与软骨细胞分化和增殖有关[2]。原癌基因（C-myc）可编码转录因子，以调节转录活性和细胞增殖、生长和凋亡[3]。C-myc 过表达可促进促炎介质的过量产生，如肿瘤坏死因子-α，白细胞介素-1β（IL-1β），一氧化氮（NO）和前列腺素。研究[4]证实，C-myc可作为诱导软骨细胞凋亡的诱导剂，而软骨细胞凋亡与骨关节炎的严重程度相关性明显。文献[5]报道，miR-24 可抑制C-myc 表达，进而调节软骨细胞增殖，生长和凋亡。三七总皂苷其主要成份为人参皂苷Rb1、人参皂苷Rg1、三七皂苷R1，作用为活血祛瘀，通脉活络[6]。具有抑制血小板聚集和增加脑血流量的作用，常用于脑血管后遗症，视网膜中央静脉阻塞，眼前房出血等[7]。研究[8]表明，三七总皂苷能够保护骨关节炎大鼠的软骨细胞免于变性。本研究探讨三七总皂苷经miR-24 靶向C-myc 对骨关节炎大鼠软骨细胞凋亡与增殖的影响，报道如下。

1 实验材料

1.1 动物 清洁级雄性SD 大鼠购自吉林大学实验动物中心，8 周龄，体质量180～220g，动物生产许可证号：SCXK（吉）2018-0002，动物使用许可证号：SYXK（吉）2018-0023，动物质量合格证号：2019012706，适应性饲养1 周后用于本实验。

1.2 药物 三七总皂苷（原料药，纯度99%，杭州甫洛生物科技有限公司，批号CAS-2037-50）。

1.3 试剂 低葡萄糖Dulbecco 改良Eagle's 培养基（L-DMEM）溶液（美国Gibco 公司，批号M0063）；Ⅱ型胶原酶（美国Sigma-Aldrich 公司，批号SA66143）；……