帅 旭 何跃东
1.四川大学华西妇产儿童医院(成都,610041);2.四川省成都市第五人民医院
宫颈癌是妇科常见恶性肿瘤,发病出现低龄化受到广泛关注[1]。宫颈病变的产生是一个持续且漫长的过程,研究发现增殖细胞核抗原(Ki67)、P53等增殖基因、抑癌基因在宫颈癌的发生发展中占据重要地位,对宫颈癌诊疗及预后均有作用[2]。蛋白激酶D1(PKD1)为近年来新发现的肿瘤调控因子,在多种恶性肿瘤细胞中均能高表达,在细胞黏附、迁移、分化、凋亡等过程中具有调节作用[3]。然而国内外对PKD1与宫颈癌的关系研究甚少。因此,本研究收集宫颈标本探究PKD1的表达及与临床病理学特征关系,为宫颈癌诊疗提供新靶点。
收集2018年1月-2019年12月本院就诊的宫颈癌患者48例(宫颈癌组)、CINⅢ患者42例(CINⅢ组)及正常宫颈者38例(对照组)的宫颈组织标本。纳入标准:①经阴道镜活检、宫颈锥切术、子宫全切术或宫颈癌手术取得宫颈组织标本,且经病理学检查证实;②年龄>18岁;③资料齐全。排除标准:①既往放化疗史;②既往宫颈手术史;③合并免疫性疾病或肝肾功能不全;④合并其他恶性肿瘤。本研究通过医院伦理委员会审批,研究对象均自愿签署知情同意书。
1.2.1免疫组化法3组标本切片脱蜡水化,0.3%H2O2-甲醇溶液处理切片;行两步免疫组化染色,利用磷酸盐缓冲液(PBS)洗3次后加PKD1抗体(武汉博士德生物工程有限公司)孵育60min,PBS洗3次加入辣根过氧化物酶标记的羊抗兔PKD1二抗(武汉博士德生物工程有限公司)孵育40min,再PBS洗3次后加入二氨基联苯胺(DAB)显色液孵育10min;经……