配伍对白头翁口服液的质量影响

石 异，喻 勇，何伟先

（1.四川齐全红动物药业有限公司，四川遂宁 629000；2.齐全农牧集团股份有限公司，四川遂宁 629000）

白头翁口服液由白头翁、黄连、秦皮、黄柏四味中药材经过提取配制而成，主治湿热泄泻、下痢脓血。由于白头翁口服液在临床运用中有抗炎、抗溃疡、抗内毒素、抗菌、止泻、抗肿瘤以及杀虫等作用，且符合我国食用性动物药品的低毒、无残留、高效药物发展方向，在禽畜业中的使用越来越广泛[1～3]。但在《兽药质量标准》2017年版中药卷相关规定中，白头翁口服液主要通过盐酸小檗碱的薄层色谱法进行定性鉴别，定性成分单一，且没有针对白头翁口服液的定量检测方法[4]。此外，白头翁口服液中含有生物碱类、香豆素类、皂苷类、甾醇类和柠檬苦素类多种化合物[5]。因此，按照《兽药质量标准》2017年版中药卷相关规定对白头翁口服液进行检查鉴定不能全面评定白头翁口服液的质量。

由于白头翁汤煎煮中所发生的复方化学变化属于物理的配伍变化[6]。仲晓宁[7]等通过运用高效液相色谱法（HPLC）对白头翁汤组方各单味药材，各药材阴性对照和白头翁汤提取液的HPLC 图进行对比鉴别，各药材HPLC 特征峰明显，推论出HPLC色谱图能较好监控白头翁汤的质量。贾娅倩[8]等运用高效液相色谱法（HPLC），建立了测定白头翁汤中4 味中药（白头翁、黄连、黄柏及秦皮）的6种成分含量方法，并验证了该方法的可靠性、操作性。张璐[9]等选择黄连中关键指标盐酸巴马汀和盐酸小檗碱为含量测定成分，根据《中国兽药典》2015年版二部中相关规定，结合转移率，考虑药厂大规模生产转移率低于实验室小试转移率，运用高效液相色谱法对市售白头翁口服液进行了有效的质量评价。由此可见，白头翁口服液可以采用高效液相色谱法（HPLC）进行质量控制。

由于白头翁口服液中黄连含盐酸小檗碱，对痢疾杆菌、大肠杆菌、金葡菌、伤寒杆菌及阿米巴原虫等有抑制作用，是治疗肠道感染及菌痢的重要药物。而白头翁汤中盐酸小檗碱会发生沉淀，导致含量降低，且盐酸小檗碱含量降低的多少与药材种类、数量等因素有关[10]。因此，白头翁口服液的组方比例是影响其质量的重要因素。为了提高白头翁口服液的质量，分别以黄连重量为定量，按照《兽药质量标准》2017 版中药卷中白头翁口服液组方比例（白头翁：黄连：秦皮：黄柏=4:2:4:3）、丁林生[11]等组方比例（白头翁：黄连：秦皮：黄柏=5:2:4:4）、《伤寒论》[12]原方中白头翁汤组方比例（白头翁：黄连：秦皮：黄柏=2:3:3:3）进行组方提取，比较3 个比例组方提取后黄连中关键指标盐酸巴马汀和盐酸小檗碱的含量，对白头翁口服液进行质量对比。

1 材料

1.1 主要仪器

SPD-20A 型高效液相色谱仪（岛津企业管理（中国）有限公司）；AE-240 型电子分析天平（梅特勒-托利多国际贸易（上海）有限公司）。

1.2 试剂

乙腈（色谱纯）；乙醇、盐酸、甲醇（分析纯）均购于遂宁淇锐实验仪器化工有限公司。

1.3 药品

盐酸小檗碱对照品、盐酸巴马汀对照品（中国兽医药品监察所）；白头翁、黄连、黄柏、秦皮药材（四川全泰堂中药科技有限公司）。

2 方法

2.1 色谱条件

依据《中华人民共和国兽药典》2015年版二部黄连的含量测定中条件。

2.2 供试品溶液的制备

按照《兽药质量标准》2017 版中药卷中白头翁汤口服液比例，取白头翁12g、黄连6g、秦皮12g、黄柏9g，每次加水100ml 煎煮，煎煮3 次，合并煎液，滤过，加入乙醇，使含醇量达75%，静置12h，滤取上清液回收乙醇，加水调至39ml，即得，标为A1。

按照丁林生等组方比例，取白头翁15g、黄连6g、秦皮12g、黄柏12g，每次加水100ml 煎煮，煎煮3 次，合并煎液，滤过，加入乙醇，使含醇量达75%，静置12h，滤取上清液回收乙醇，加水调至39ml，即得，标为A2。

按照《伤寒论》中白头翁汤原方比例，取白头翁4g、黄连6g、秦皮6g、黄柏6g，每次加水100ml 煎煮，煎煮3 次，合并煎液，滤过，加入乙醇，使含醇量达75%，静置12h，滤取上清液回收乙醇，加水调至39ml，即得，标为A3。

分别精密量取以上3 种供试品2ml，置于50ml量瓶中，加入甲醇—盐酸（100:1）的混合溶液适量，超声10min，室温放置，加甲醇—盐酸（100:1）的混合溶液稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液，分别按照原先的顺序标记为A1、A2、A3。

2.3 对照品溶液的制备

取盐酸巴马汀对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml 含10μg 的溶液，即得。

取盐酸小檗碱对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml 含10μg 的溶液，即得。

2.4 测定方法

利用高效液相色谱仪，依据《中华人民共和国兽药典》2015年版二部黄连的含量测定方法依次对A1、A2、A3 进行测定。在黄连药材重量、理化条件一致的情况下，各组方比例中，《兽药质量标准》2017年版中药卷白头翁口服液组方比例中盐酸小檗碱含量最高，效果最好。结果见表1。

表1 3 种供试品溶液测定结果（mg/g）

3 讨论

本试验仅测定了在黄连药材重量一定的情况下盐酸小檗碱的含量，其他情况下的组方比例影响还待进一步探讨。