pncA、rpsA和panD基因突变对结核分枝杆菌吡嗪酰胺耐药性的预测效能分析

赵东阳，石 洁，苏茹月，郑丹薇，朱岩昆，马晓光，王少华，李 辉，孙国清，孙定勇

河南省疾病预防控制中心 郑州 450016

吡嗪酰胺(pyrazinamide，PZA)作为一种前沿抗结核药物在结核病一线和二线治疗方案中均发挥重要作用[1]。该药物能有效对抗体内巨噬细胞中滞留的不能被其他的抗结核药物所杀死的结核分枝杆菌。PZA需要在吡嗪酰胺酶(PZase)的作用下转化为有活性的吡嗪酸发挥作用。PZase是由561个核苷酸编码的蛋白。pncA基因突变导致PZase失活，是引起结核分枝杆菌对PZA耐药的主要机制。pncA突变具有高度可变性，且散在分布于开放阅读框及上游基因调控区域[2]。除了pncA基因突变外，编码30S核糖体蛋白S1的基因rpsA突变后，会改变吡嗪酸的结合位点，也可引起PZA耐药[3]。有研究[4]表明panD和结核分枝杆菌PZA的耐药相关。到目前为止，rpsA和panD突变是否引起结核分枝杆菌PZA耐药仍有争议性，因此需要更多实验数据来阐明两者与PZA耐药的关系。

由于PZA只有在低pH值条件下才具有抗菌活性，因此在做PZA药敏测定时需在酸性环境下进行。且PZA药敏测定操作较复杂，实验失败可能性较大，同时结核分枝杆菌生长周期长，常规PZA药敏检测需要2～3周，因此近年来分子诊断成为检测PZA耐药的一种重要工具。本研究对152株耐多药(MDR)结核分枝杆菌菌株进行了PZA药敏测定，同时对pncA、rpsA和panD突变预测PZA耐药性的效能进行了评价。

1 材料与方法

1.1样本来源收集2018年1月至12月于新密市、嵩县、扶沟县、焦作市疾病预防控制中心，中牟县卫生防疫站，邓州市、南阳市、开封市、安阳市结核病防治所，鹤壁市传染病医院就诊的152例MDR肺结核病患者的痰标本，进行痰培养。……