白藜芦醇通过下调POLD1抑制乳腺癌MDAMB-231细胞上皮间质转化

王梦欣，梁至洁,2*，黄东琳，万言，蒋洪棉，黎洪棉，陈茂剑，韦长元

0 引言

上皮间质转化（epithelial-mesenchymal transition,EMT）被认为是癌细胞获得转移侵袭能力的生物学行为基础[1]，众多细胞因子及转录因子参与了癌细胞EMT的调控[2]。近年来也有学者逐渐发现一些药物或者治疗手段可以通过逆转细胞的EMT状态从而达到降低细胞耐药性和杀伤细胞的目的[3]。

乳腺癌细胞中异常的DNA复制与侵袭能力密切相关。DNA聚合酶-δ（polymerase delta,Pol-δ）是DNA复制的关键酶，而DNA聚合酶的催化亚基基因POLD1编码的蛋白P125是Pol-δ的活性亚基之一。我们的前期研究发现POLD1在乳腺癌组织中高表达，与患者的临床分期[4]及细胞的侵袭能力[5]关系密切，可能是调控乳腺癌细胞EMT的重要靶点之一。

白藜芦醇（resveratrol,RSV）已被证实能对乳腺癌细胞的侵袭[6]、EMT[7]及衰老[8]等多种生物学行为进行调控，其对乳腺癌的疗效是肯定的，进一步探索其中的调控机制有利于寻找更多的作用靶点和调控涉及的通路。POLD1是乳腺癌细胞维持肿瘤相关行为的重要基因，但目前尚无研究指出RSV对POLD1的调控机制。本研究拟探索RSV对POLD1的调控作用，并探究POLD1在RSV抑制MDAMB-231细胞侵袭过程中发挥的作用及机制。

1 材料与方法

1.1 主要试剂与设备

MDA-MB-231细胞购自中国科学院上海生命科学研究院细胞资源中心。POLD1过表达重组慢病毒颗粒购自上海复百澳生物科技有限公司。胎牛血清（FBS）、胰酶、DMEM培养基和青、链霉素溶液均购自美国Gibco公司。细胞培养瓶、Transwell小室、6孔板、24孔板均购自美国Corning公司。基质胶购自美国BD公司。磷酸盐缓冲液（phosphate buffered saline,PBS）购自索莱宝生物试剂有限公司。……