组织块法与酶消化法培养人脐带间充质干细胞的比较

袁涛，刘文杰，王蕾，王树玉，刘英*

(首都医科大学附属北京妇产医院，1.生殖医学科；2.产科，北京 100026)

间充质干细胞(Mesenchymal stem cells，MSC)存在于多种组织内，是组织工程和再生医学中理想的种子干细胞[1]。近年来，许多研究人员已经将注意力集中在脐带来源的MSC。人脐带间充质干细胞(Human umbilical cord mesenchymal stem cells，hUC-MSCs)应用于生物工程的优越性在于：(1)脐带是医疗废弃物，来源广泛；(2)分离、培养方法简便，易于传代扩增获取大量细胞；(3)脐带受到胎盘屏障功能的保护，被污染的可能性小；(4)脐带免疫原性低；(5)可塑性强；(6)无伦理及法律方面的争论[2-3]。与其他MSC一致，hUC-MSCs在适当的培养条件下可以被诱导分化成各胚层的功能细胞，如神经细胞、软骨和骨细胞、脂肪细胞、横纹肌细胞、胰岛分泌细胞、心肌细胞、生殖细胞等[4-7]。以上特性使hUC-MSCs成为科学家们的研究热点。

目前，hUC-MSCs的分离和培养方法尚无统一标准，对现有的方法进行比较分析，可帮助研究人员找到更合理有效的方法。本课题选择足月顺产中获得的新鲜脐带，用组织块法和酶消化法两种方法分离、培养hUC-MSCs，并对其进行传代扩增及鉴定，观察两种方法获得的细胞形态、生长曲线、免疫标志物等指标特征。

材料和方法

一、研究对象

选取本院产科自然分娩的健康足月新生儿5例，获得其双亲知情同意后取5根脐带组织，每根脐带均用两种方法分离hUC-MSCs。产妇无妊娠并发症，HBV、HIV、梅毒等抗体检测均为阴性。本研究获得首都医科大学附属北京妇产医院医学伦理委员会的审核批准。

二、主要试剂……

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