HIF-1α对人结直肠癌细胞裸小鼠成瘤性的影响

杨 宝，王 婧，陈 超，周 洁，李 海

1.宁夏医科大学总医院结直肠外科，宁夏 银川 750004；2.宁夏医科大学总医院内分泌科，宁夏 银川 750004；3.江苏省人民医院普外科，江苏 南京210029

随着中国人生活水平的不断提高，老年患者中结直肠肿瘤的发病率也呈逐年升高趋势。目前对于中晚期结直肠癌患者尚无统一有效的治疗方法，探索影响结直肠肿瘤发生、发展的因子，有利于提高老年患者的治疗效果及生存率。缺氧诱导因子-1α（hypoxia-inducible factor-1α，HIF-1α）因其在肿瘤发生、发展过程中的关键作用，成为研究热点。之前研究［1］表明，HIF-1α也会影响结直肠肿瘤的发生、发展。肿瘤细胞恶性增殖数量短时间内激增，血管供氧不足，造成局部缺氧环境，而有研究［1］发现，HIF-1α在这种缺氧环境中表达异常增高。HIF-1α可以诱导血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，ⅤEGF）的产生，为肿瘤的增殖提供充足的营养物质［2］。而在这些研究中，大部分仅局限于体外细胞实验来证明HIF-1α在肿瘤中的作用。本文通过裸小鼠移植瘤实验，将人结肠癌HCT116细胞注入到裸小鼠体内，来探讨HIF-1α对结直肠肿瘤细胞成瘤性的影响。

1 材料和方法

1.1 实验材料

HCT116细胞购自美国模式培养物保藏所（American Type Culture Collection，ATCC），BALB/c裸小鼠（雄）30只购自宁夏医科大学动物实验中心，Annexin Ⅴ-异硫氰酸荧光素（fluorescein isothiocyanate，FITC）/碘化丙啶（propidium iodide，PI）细胞凋亡检测试剂盒购自甘肃海基生物科技有限公司，McCoy’s 5A培养基购自美国Gibco公司，兔多克隆抗体（HIF-1α）购自美国Abcam公司，HRP标记山羊抗兔IgG抗体购自美国Proteintech公司，反转录试剂盒购自宝生物工程（大连）有限公司，TRIzol试剂购自美国Invitrogen公司。

1.2 实验方法

1.2.1 细胞的复苏与培养