一株1-萘酚生产菌的分离、鉴定及培养条件优化

邱程刚，李 康，陶 沙，钱 颖，张阿磊，陈可泉,2，欧阳平凯,2

(1. 南京工业大学 生物与制药工程学院，江苏 南京 211800；2. 国家生化工程技术研究中心，江苏 南京 211800)

1-萘酚是一种重要的平台化学品，可广泛用于染料、药物、杀虫剂、香水和表面活性剂等领域[1-2]。据统计，全球每年1-萘酚的需求量超过4万t[3]。目前，1-萘酚主要由化学氧化催化萘制得(如α-萘磺酸碱熔法、α-萘胺水解法、四氢萘法制萘等)[4]，但化学法存在副产物多、反应条件要求苛刻和环境污染严重等问题。因此，开发高效绿色的1-萘酚生产方法尤为重要。生物法由于反应条件温和、专一性强、特异性强，受到越来越多的关注[2,5-9]。

目前，生物法制备1-萘酚主要是以萘为底物，酶法催化合成1-萘酚。例如，在添加外源辅酶NADPH的条件下，Liu等[10]克隆表达的P450酶催化转化萘制备1-萘酚，产量为1.83 mg/L。在添加外源辅酶H2O2的条件下，Martinez等[11]通过克隆表达非特异性单加氧酶(UPO)，催化转化萘可制备48 mg/L的1-萘酚。Garikipati等[12]利用异源表达的甲苯邻位单加氧酶(TOM)，以萘为底物制备1-萘酚，产量达14.4 mg/L；此外，他们还研究了TOM-Green工艺转化萘得到1-萘酚(86.4 mg/L)，在此基础上利用全细胞两相催化，1-萘酚的产量可达1.43 g/L。

自然界中，微生物种类多样，具有生产各种产品的潜力。萘作为一种常规环境污染物，可被自然界中很多微生物氧化为1，2-二羟基萘、龙胆酸及水杨酸等小分子物质，进而被降解[13-16]。然而，直接转化萘合成1-萘酚的研究较少，Inoue等[7]研究发现，野生菌发酵生产1-萘酚，产量为21.23 mg/L。因此，挖掘将萘转化为1-萘酚的天然微生物资源在环境保护和经济方面均具有重要意义。……