肿瘤相关抗原MAGE-D4在肝细胞癌中的表达及其意义

罗 鑫， 沈 宁， 刘 畅， 张 沅， 林丽娜， 李 枫， 李冰滢， 肖绍文， 陈 芳， 张庆梅

肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)占原发性肝癌的70%～90%[1]，具有恶性程度高、发病隐匿、侵袭性强、预后差和生存率低等特点[2]，急需探索新的HCC治疗方法。近年来，肿瘤免疫治疗因其较好的特异性和较小的副作用而备受关注[3]，但肿瘤免疫治疗需要筛选肿瘤特异性抗原。黑色素瘤相关抗原(melanoma-associated antigen,MAGE)是一个多基因的大家族，因其第一个成员首先在黑色素瘤中发现而得名，可分为A、B、C、D、E、F等亚家族，其许多成员在多种肿瘤类型中呈特异性高表达，被视为肿瘤免疫治疗的理想靶点[4]。MAGE-D4是2001年Sasaki等[5]发现的一个MAGE家族成员，与其他许多成员一样，其基因定位于X染色体，具有MAGE家族共有的同源结构域(MAGE homology domain,MHD)。有研究报道MAGE-D4在胶质瘤、脑膜瘤、结直肠癌和口腔癌等多种恶性肿瘤中呈高表达[6-11]，而在正常组织中不表达或低表达[5，8]，提示MAGE-D4具有肿瘤特异性，具有进一步开发成肿瘤免疫治疗靶点的潜力。本研究应用在线数据库结合实验验证，分析HCC中MAGE-D4 mRNA和蛋白质的表达水平及其与患者临床病理参数的关系，并探讨其表达水平与生存预后的关联性，初步评价MAGE-D4作为HCC潜在治疗靶点和预后标志物的潜在价值。

1 材料与方法

1.1数据获取及分析 通过癌症基因组图谱(the Cancer Genome Atlas,TCGA)数据库(https://cancergenome.nih.gov/)获取371例HCC组织和50例正常肝组织的转录数据。应用数据挖掘工具UALCAN(http://ualcan.path.uab.edu/)分析HCC组织中MAGE-D4 mRNA的表达，mRNA表达水平以每千个碱基的转录每百万映射读取的抄本数(transcripts per kilobase of exon model per million mapped reads,TPM)表示。通过对TCGA数据库中的基因转录本数据进行预处理，以尽可能多地获取各种不同基因的RNA水平表达数据，最终获得共56 953个基因的RNA表达数据。……