circ_0009910对结直肠癌细胞增殖、凋亡的影响及机制

何明璇，王鹏，冯娜欣，刘锦燕

保定市第二医院肿瘤内科血液科，河北保定071051

结直肠癌是临床常见恶性肿瘤之一［1-2］。由于其发病机制复杂，患者预后较差，转移性晚期结直肠癌患者的5年生存率低至10%［2］。因此，迫切需要发现新的生物学标志物协助临床早期诊断、治疗。环状RNA（circRNA）是一种特殊的新型内源性非编码RNA，形成共价闭合的连续环，并在真核转录组中高表达［3］。circRNA可与微小RNA（miRNA）相互作用［4］。miRNA是一种进化保守的小型调节性非编码RNA，参与细胞增殖、凋亡等多种生物学过程［5］。研究表明，circ_0009910在急性髓系白血病患者中表达上调，敲低其表达可抑制白血病细胞增殖，诱导白血病细胞凋亡［6］。circ_0009910在骨肉瘤细胞中表达上调，下调其表达抑制骨肉瘤细胞的增殖，促进细胞凋亡［7］。miR-198在结直肠癌细胞中表达下调，过表达miR-198抑制结直肠癌细胞的增殖和克隆形成，促进细胞凋亡［8］。miR-198在胃癌细胞中低表达，上调其表达抑制胃癌细胞的增殖、迁移和侵袭，促进细胞凋亡［9］。我们前期研究证实，circ_0009910在结直肠癌组织中高表达，miR-198在结直肠癌组织中低表达。但circ_0009910是否通过靶向调控miR-198影响结直肠癌细胞增殖、凋亡，目前还尚未可知。2016—2020年，本研究对此做了探讨。

1 材料与方法

1.1 细胞、试剂及仪器 结直肠癌细胞株SW620（美国典型培养物保藏中心）。DMEM培养基、FBS、TRIzol试剂、Lipofectamine 2000（美国 Invitrogen公司），miR-198 mimic/inhibitor、对 照 miR-NC、anti-miR-NC（上海Genechem公司），circ_0009910特定siRNA si-circ_0009910、对 照 si-NC、pcDNA-circ_0009910、空载体pcDNA（上海GenePharma公司），Prime Script RT Master Mix试剂盒（日本Takara公司），SYBR Master Mix（美国ABI公司），MTT（上海Bio Basic公司），膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素（Annexin V-FITC）/碘化丙啶（PI）试剂盒（美国BD Biosciences公司），二辛可宁酸（BCA）蛋白测定试剂盒（美国BioRad公司），BeyoECL试剂盒（上海Beyotime公司）。……