菜心BcSVP基因mRNA在异源嫁接体中的运输分析

陶 鹏，赵彦婷，岳智臣，雷娟利，李必元

(浙江省农业科学院 蔬菜研究所，浙江 杭州 310021)

嫁接是农业生产中一种常用的农艺技术，也是科学研究中的一种研究手段[1-2]。构建嫁接体是研究植物基因mRNA长距离运输的常用方法，基于不同物种中的直系同源基因之间的序列差异，可研究mRNA在穗砧中的上下运输[3]。利用拟南芥花序轴嫁接，通过RT-PCR检测到GAI的mRNA在穗砧之间进行了运输[4]。利用苹果树嫁接检测到IAA14基因的mRNA从砧木运输到接穗中[5]。此外，一些开花基因的mRNA也被证实发生了长距离运输。前人发现青花菜和拟南芥中AGL24的mRNA可在韧皮部中长距离运输，在砧木中超表达AGL24，会促进接穗提早开花[6]。SVP基因编码了一种MADS-box转录调控因子，在基因序列上与AGL24基因相似，但在调控开花时间上却呈现相反功能[7-8]。拟南芥的SVP基因会作用于顶端分生组织并降低赤霉素的生物合成来抑制开花[9]。SVP与AGL24共表达在花发育早期，参与调控花器官的分化[10-11]。而在序列上类似于AGL24的SVP基因的mRNA是否会像AGL24 mRNA通过韧皮部进行长距离运输还有待揭示，验证SVP基因mRNA长距离运输可为深入研究SVPmRNA运输的分子机制打好基础。

前期研究显示，结球甘蓝与菜心相互嫁接具有很好的亲和力[12]，是研究BcSVP的mRNA在结球甘蓝/菜心异源嫁接体中的长距离运输的前提条件。本研究基于结球甘蓝/结球甘蓝嫁接的接穗结球甘蓝茎尖和菜心实生苗叶片的转录组测序数据拼接获得了结球甘蓝BoSVP和菜心BcSVP的编码区序列和3’UTR序列。利用结球甘蓝和菜心SVP的种间差异序列，在异源嫁接体的接穗结球甘蓝茎尖的两个文库中筛选出了3条来自菜心的SVP基因的mRNA read。……