张婷婷,王 苹,张建伟
(福建中医药大学中医学院,福建 福州350122)
近年来,随着对乳腺肿瘤发病机制研究的不断深入,通过RNA干扰在乳腺肿瘤治疗中的应用有了很大的进步。研究发现,一些微小的干扰RNA对肿瘤细胞中的信号转导、细胞凋亡、分化等过程有显著的抑制作用[1]。而Let-7a就是一种微小RNA,能通过调节转录因子在RNA转录后起到调节作用,在许多肿瘤细胞的生长及分化中发挥重要作用。本文选择乳腺增生模型大鼠为研究对象,以当归芍药散加味方为治疗组,通过实时定量PCR法检测模型大鼠乳腺上皮细胞Let-7a基因的表达,以探讨当归芍药散加味方治疗乳腺增生病可能的作用机制。
1.1 实验动物40只SPF级SD雌性健康未孕大鼠,10周龄,体质量(193.78±5.78)g,许可证号:SCXK(沪)2017-0005,购自上海斯莱克实验动物有限责任公司。饲养于福建中医药大学动物实验中心,合格证号:2015000545959。
1.2 实验药物 当归芍药散加味方方药组成:当归15 g,芍药15 g,川芎8 g,茯苓10 g,白术15 g,泽泻10 g,浙贝母12 g,柴胡8 g,香附12 g,丹参15 g,由福建中医药大学附属第二人民医院中药房提供。常规煎煮后减压浓缩至所需浓度(含生药1 g/mL),放置于冰箱储存备用。乳消Ⅲ胶囊由福建省第二人民医院制剂科提供(院内制剂,批准文号:闽药制字Z05104028)。
1.3 实验试剂 苯甲酸雌二醇注射液(上海通用药业股份有限公司);黄体酮注射液(浙江仙琚制药股份公司);10%水合氯醛溶液、RNAiso plus[宝日医生物技术(北京)有限公司];焦碳酸二乙脂(DEPC)水(中国索莱宝科技有限公司);PrimeScriptTMRT reagent Kit with gDNA Eraser(Perfect Real Time)[宝日医生物技术(北京)有限公司];……