IgM抗N抗体引起ABO血型正反定型不符1例

苏建聪，周建月，王婉君

(广西医科大学第二附属医院输血科，广西 南宁 530007)

健康者血清冷凝集素效价在4 ℃时一般不超过16[1]，其在0～5 ℃时反应最强，一般在25～30 ℃时凝集强度减弱[2]。MNS是第2个被发现的血型系统，其复杂性仅次于Rh血型系统[3]。抗N抗体通常是自然产生的，与抗M抗体比较相对少见，免疫型抗N更少遇到，抗N抗体临床意义不大，除非其在37 ℃时反应[4]。本院采用一系列免疫血清学实验技术证实了1例患者产生免疫球蛋白M(IgM)性质的抗N抗体，该抗体引起室温下全自动血型分析仪在使用微柱凝胶卡进行血型鉴定检测时出现ABO血型正反定型不符的情况，现报道如下。

1 临床资料

1.1病例介绍 患者，女，67岁。2020年3月以胃体息肉样隆起病变待查收入院，无输血史，有妊娠史，有30多年乙型肝炎史，对虾、鳖过敏。临床诊断为肠息肉，行肠镜息肉切除术，血常规检查：白细胞计数3.87×109L-1、血红蛋白132.3 g/L、血小板计数165.6×109L-1。该患者乙二胺四乙酸二钠(EDTA-Na2)抗凝静脉血标本初次在全自动血型仪微柱凝胶(卡式)血型鉴定中(室温立即离心)结果：正定型表现为B型Rh(D)阳性，反定型表现为A1红细胞4+、B红细胞2+(O型)，自身对照阴性。

1.2检测仪器及试剂 全自动血型分析仪Microlab ATAR Line：Microlab ATAR IVD型(瑞士哈美顿博纳图斯股份公司)；医用离心机：TO-A型(长春博研科学仪器有限责任公司)；免疫血液学用离心机：KA-2200(日本久保田株式会社)。ABO、RhD血型定型检测卡(批号：20191105)、不规则抗体检测试剂盒(人红细胞)(批号：20200201)、抗人球蛋白检测卡(不规则抗体筛检)(批号：20191201)、BX-1型样本释放剂(批号：20200101)，均为长春博迅生物技术有限责任公司产品；抗 A抗 B血型定型试剂(单克隆抗体)(批号：20190305)、人ABO血型反定型用红细胞试剂盒(批号：20205305)、RhD(IgM)血型定型试剂(单克隆抗体)(批号：20191805)、样本释放剂(2-ME)(批号：20197702)、抗M和抗N(单克隆抗体)(批号：20191107)，均为上海血液生物医药有限责任公司产品；Hungary(匈牙利)进口REAGENS谱细胞(批号：732003)。

1.3检测方法 对患者的EDTA-Na2抗凝静脉血标本采用盐水试管法和卡式微柱凝胶技术进行ABO、RhD血型鉴定、不规则抗体筛查、抗体鉴定、抗体效价检测、抗体类型检测，方法均按照《免疫血液学》[5]操作规程或试剂说明书操作。

1.4检测结果

1.4.1患者血标本在不同温度条件下ABO、RhD血型鉴定、MN血型检测、不规则抗体筛查实验检测结果 在室温和4 ℃条件下正定型为B型，反定型为O型，Rh(D)阳性，自身对照出现弱凝集现象，不规则抗体筛查为阳性，MM血型；在37 ℃条件下正反定型相符，表现为B型Rh(D)阳性，不规则抗体筛查为阴性。见表1。

表1 不同温度条件下检测结果

1.4.2患者血浆与谱细胞抗体鉴定结果 在室温和4 ℃条件下抗体鉴定结果为抗N，在37 ℃条件下盐水试管法和卡式微柱凝胶法抗体鉴定结果均为阴性。见表2。

表2 患者血浆抗体鉴定结果(盐水试管法)

1.4.3吸收放散试验(试管法)检测结果 采用O型N抗原阳性和阴性2种压积红细胞在4 ℃条件下吸收患者血浆30 min，生理盐水洗涤4次，将洗涤后的压积红细胞按BX-1型2-ME使用说明进行放散试验，分离出放散液后分别在室温、4 ℃、37 ℃条件下进行抗体鉴定试验，结果O型N抗原阳性细胞的放散液在室温、4 ℃条件下检出抗N抗体，在37 ℃条件下未检出抗体；O型N抗原阴性细胞放散液在室温、4 ℃和37 ℃条件下均未检出抗体，结合抗体鉴定试验证实患者血浆中存在抗N抗体。

1.4.4患者血浆抗体效价及抗体性质检测结果 在室温条件下抗体效价为16，在4 ℃条件下抗体效价为32；经2-ME试验处理后患者血浆与N抗原阳性细胞在室温和4 ℃条件下均未出现凝集，结合37 ℃条件下不规则抗体筛查结果为阴性，抗体性质鉴定为IgM型。见表3。

表3 抗体效价检测及2-ME试验(盐水试管法)

2 讨 论

本例患者近期无输血史，可认定为天然产生的抗N抗体，如表1所示，该抗体在室温和(或)4 ℃条件下干扰了ABO血型鉴定中的反定型结果并使不规则抗体筛查阳性，但在37 ℃条件下又使ABO血型鉴定结果正反相符和不规则抗体筛查阴性的现象。

据文献报道，河北省汉族人MN血型3种类型比例分别为MN血型为30%左右，N血型为23%左右，M血型为50%左右[6]，而检出抗N抗体的文献报道不多，属少见抗体，本例为本院首次检出，如表2所示，其引起ABO血型鉴定正反定型不符的现象与文献[7-8]报道基本一致。

如表3所示，患者血清经2-ME处理后与谱细胞中7号细胞并没有反应，可判断该抗体为IgM性质的抗N抗体，室温效价为8，4 ℃效价为16，与王民权等[7]报道的检出IgM抗N，室温效价为16基本一致，但比徐秀云等[8]报道的检出IgM抗N抗体常温效价小于或等于1，4 ℃效价为4略高。抗N抗体在37 ℃时通常不起反应，如果交叉配血和不规则抗体筛查或鉴定中不在室温和(或)4 ℃条件下检测，抗体通常不会被检测出来[9]。然而，通过多次输血可以产生具有免疫活性的抗N抗体，引起溶血性输血反应，也有导致新生儿溶血性疾病的文献报道[10]。因此，对N抗原阴性或已存在抗N抗体的贫血患者非紧急情况输血时仍需寻找匹配的红细胞输注。

总之，影响ABO血型正反定型的因素有很多，如为不规则抗体的影响，输血科能鉴别出该抗体的种类及其血清学特征，对保证输血相容性检测结果的准确性及临床输血治疗具有重要意义。