IL-1β基因修饰的脂肪间充质干细胞移植治疗急性肝衰竭的实验研究①

徐杨超 赖 青 吴 坚 汪 炜 郑 敏（江西医学高等专科学校，上饶334000）

急性肝衰竭是由病毒、酒精、药物等多种病因引起的大量肝细胞死亡导致的肝功能障碍与失代偿［1-2］，其有效治疗方法为原位肝移植，但由于存在供体短缺、排斥反应、价格较贵与疾病进展较快等问题限制了其临床应用。随着干细胞学、肝细胞再生与免疫学方面研究的深入开展，使得再生医学临床治疗终末期肝病成为可能。

脂肪间充质干细胞（adipose derived mesenchymal stem cell，ADSC）是一类具有多向分化潜能、免疫调控功能与自主更新能力的干细胞，可被诱导分化为肝样细胞，参与细胞的趋化与黏附，发挥抗纤维化与免疫调节作用来治疗肝脏疾病［3-5］。通过搭载目的基因以强化或改善ADSCs功能活性，增强其对急性肝脏衰竭的保护作用，对进一步发掘ADSCs的作用和价值意义重大。作为IL-1的主要形式，IL-1β对肝细胞具有保护作用［6］。因此本实验主要观察IL-1β基因修饰的ADSCs移植治疗急性肝衰竭的作用。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 实验动物6周龄健康雄性SD大鼠57只，体重（210±15）g，SPF级，其中54只用于急性肝衰竭模型的建立，另外3只用于ADSCs的分离培养。将所有动物饲养于18～25℃，相对湿度40%～60%的环境中，12 h/12 h明暗交替，自由进食水，适应性喂养1周后进行实验。

1.1.2 主要试剂与仪器 戊巴比妥钠（57-33-0，上海氟德化工有限公司）；胎牛血清、DMEM完全培养（百恩维生物科技有限公司）；IL-1β（I2393-10UG，Sigma-Aldrich）；D-氨基半乳糖（化夏化学北京公司）；谷丙转氨酶、谷草转氨酶、总胆红素试剂盒（武汉伊莱瑞特生物科技股份有限公司）；质粒Helper1.0、Helper2.0（吉凯基因有限公司）；……