间充质干细胞外泌体通过抑制COX-2和NF-κB激活及p38 MAPK磷酸化缓解小鼠溃疡性结肠炎①

刘继攀 孙 伟 宋 默 李凤丹 赵学影（哈励逊国际和平医院，衡水053000）

溃疡性结肠炎（ulcerative colitis，UC）是一种发病率较高的慢性非特异性肠道疾病，长期反复发病于直肠和结肠，主要病理表现为肠道炎症和溃疡，主要症状为腹泻、腹痛、血便等。UC发病率逐年上升，且被认为是导致结肠癌的主要原因之一［1］。UC的发病机制尚未明确，多被认为与炎症、感染、肠道菌群、遗传等因素有关，临床上UC无法根治，主要以抗炎、调节菌群等为主要治疗手段［2-3］。因此寻找有效的UC治疗方法非常重要。近年干细胞疗法逐渐用于各种不可逆损伤性疾病治疗，研究表明间充质干细胞（mesenchymal stem cells，MSCs）可能用于UC临床治疗，但移植数量、并发症预防、治疗长效性等问题仍然阻碍其临床应用［4］。外泌体是一类由多种活细胞分泌的30～100 nm的胞外囊泡，可携带多种宿主细胞遗传信息［5］。研究表明，MSCs外泌体可用于多种疾病治疗且副反应较少［6］，但MSCs外泌体在UC中的应用尚未有明确报道，本研究探究MSCs对UC的影响及机制，旨在为UC治疗提供新思路。

1 材料与方法

1.1 材料SPF级4周龄C57BL/6雌性小鼠30只（河北省实验动物中心），许可证号：SCXK（冀）2018-0010，体重15 g；CD79、CD90、CD11B、CD45检测抗体（福麦斯生物技术有限公司）；CD9、CD63、TSG101抗体（南京凯基生物技术有限公司）；COX-2、NF-κB、P-p38 MAPK、p38 MAPK、GAPDH抗体（沈阳万类生物技术有限公司）；流式细胞仪（Beckman公司）；葡聚糖硫酸钠（DSS，美国MPBiomedicals公司）。

1.2 方法

1.2.1 MSCs分离与鉴定4周龄C57BL/6小鼠颈椎脱臼处死，酒精消毒，解剖取股骨和胫骨，剪去两端，含10%胎牛血清的原代细胞培养液反复冲洗骨髓腔3次，打散冲洗出的骨髓腔内细胞，所得细胞团块用70 μm细胞筛过滤除去细胞团块。……