基于TCGA数据库观察血管生成素样蛋白1在肺癌细胞生物学行为中的作用机制①

王西勇 丁陈波 戴 玉 夏宏林（安徽医科大学附属宿州医院（宿州市立医院），宿州234000）

肺癌是全球范围内最常见的恶性肿瘤之一，其死亡率位于所有肿瘤首位［1］。早期远处转移是肺癌高死亡率的主要原因，其原因为肺癌细胞迁移和侵袭促进肺癌肿瘤生长和转移［2］。血管生成素样蛋白1（angiopoietin-likeprotein1，ANGPTL1）是维持血管完整和稳定的重要因子，在肿瘤形成、血管生成和重塑过程中扮演重要角色［3-4］。目前临床已证明ANGPTL1在胃癌、乳腺癌等肿瘤中异常表达，且与肿瘤发生发展密切相关，但其在肺癌中的表达及其生物学特性尚未见报道［5-6］。本研究通过TCGA数据库分析ANGPTL1在肺癌和癌旁组织中的表达与其与预后的关系，同时构建过表达ANGPTL1的肺癌细胞系，观察其对肿瘤细胞增殖、侵袭和迁移等生物学行为的影响。

1 材料与方法

1.1 材料 人肺癌细胞株NCI-H292、NCI-H460、LTEP-A-2，人正常肺上皮细胞BEAS-2B购自美国菌种保藏中心ATCC；NCI-H460-ANGPTL1 mimic及阴性对照NCI-H460-NC质粒、Drp1、PGAM5、Bax和GAPDH引物由上海吉玛制药技术有限公司设计合成；DMEM∕F12培养基（D8900）、DMEM培养基（D777）、1640培养基（R6504）、L15培养基（L4386）购自Sigma；SYBR Green荧光定量PCR检测试剂盒（QPK-201）购自Toyobo；双荧光素酶报告基因检测试剂盒（RG027）购自碧云天；Trizol reagent（9009）购自TaKa-Ra；Matrigel基质胶（356234）购自BD；MCO-15AC细胞培养箱购自SANYO；Ti-U∕Ti-s倒置荧光显微镜购自Nikon；R480实时荧光定量PCR仪购自Roche。

1.2 方法

1.2.1 数据来源 从生物信息数据库TCGA中的肿瘤大数据分析网站GEPIA中查询ANGPTL1在肺癌组织和癌旁正常组织中的表达（癌旁组织52例，肺癌组织503例），同时分析肺癌患者中ANGPTL1高表达和低表达与预后的关系。

1.2.2 RT-PCR检测ANGPTL1 mRNA表达 收集人肺癌细胞株NCI-H292、NCI-H460、LTEP-A-2、正常肺上皮细胞BEAS-2B及稳转……