抗牙龈卟啉单胞菌卵黄抗体脂质体的制备及抗菌作用研究

韩 旭，徐 燕，徐涵颖，王腾飞，沈继龙，桂双英

牙龈卟啉单胞菌(

Porphyromonas

gingivalis

，

P.gingivalis

) 是慢性牙周炎的主要致病菌，与牙周炎的发生发展密切相关，目前临床常用辅助治疗药物如洗必泰、西吡氯铵等不仅作用时间短，而且长期使用易诱发耐药菌株和毒副作用，因此寻找一种安全有效的治疗方式具有重要的临床意义。该研究通过接种

Pg

通过主动免疫产蛋母鸡的方法获得针对牙周致病菌的卵黄抗体。采用薄膜超声分散法制备抗Pg-IgY脂质体，通过物理、形态超微结构、包封率、药物释放曲线和体外抗菌活性分析评价药物，以期达到药物缓释性能，提高药效的作用。

1 材料与方法

1.1 材料与设备

P.gingivalis

(JCM12257) (国际标准菌株 ATCC33277，广东省微生物菌种保藏中心)；哥伦比亚血琼脂培养基(江门凯林贸易有限公司)；BCA 检测试剂盒(北京原平皓生物)；抗Pg-IgY溶液(合肥安科生物有限公司)；卵磷脂(德国利保德公司)；胆固醇、三氯甲烷、生育酚等试剂(天津博迪化工技术有限公司)；细菌基因组DNA提取试剂盒(北京天根)；厌氧培养箱(Don Whitley DG250 Anaerobic workstation，英国)；恒温磁力搅拌仪(常州智博瑞仪器有限公司)；N-1001型旋转蒸发仪(日本EYELA公司)；透射电镜(JEM-ARM300F2，日本电子)；紫外可见分光光度计光谱分析仪(上海美普达公司)。

1.2

培养与鉴定

将

P.gingivalis

(ATCC33277)冻干粉，接种于哥伦比亚血琼脂培养基中，置于厌氧培养箱中(混合气比例：80% N、10% CO、10% H)，37 ℃培养48 h，见黑色菌落长出，挑取单个菌落接种于BHI液体培养基(加入维生素K1及氯化血红素)进行扩菌培养，培养24 h后用DNA提取试剂盒提取细菌的DNA利用

P.gingivalis

的16s rRNA引物进行鉴定。……