不同碘营养水平对大鼠RASSF1A基因甲基化的影响

汪靓婧，董小婉，吴 翌，许 敏，王佑民

碘对维持正常的甲状腺功能起重要作用，高碘和低碘都会增加甲状腺疾病的发生率。缺碘会造成碘缺乏病，高碘会造成高碘性甲状腺肿、甲状腺功能亢进和自身免疫性甲状腺炎等疾病。目前, 碘的负效应成为内分泌学界和地方病学界共同关注的问题。Ras相关区域家族1 A(ras-association domain family 1A, RASSF1A)是一个位于人类3号染色体短臂(3p21.3)上的抑癌基因。RASSF1A基因几乎在所有组织中都有表达，近年来，RASSF1A基因甲基化在肝癌、肺癌、胃癌、乳腺癌、甲状腺癌等肿瘤疾病中的研究日益增多。目前，有关不同碘营养水平对RASSF1A基因甲基化影响尚未见报道。该研究采用动物实验方法，对不同碘饲养状态的大鼠RASSF1A基因甲基化率进行了对比分析，以探讨RASSF1A基因甲基化与碘营养状态的关系。

1 材料与方法

1.1 主要试剂与仪器

主要试剂：碘化钾试剂(天津市凯通化学试剂有限公司)，血清游离三碘甲腺原氨酸(free 3,5,3′-L-triiodo-thyronine, FT3)、游离甲状腺激素(free 3,5,3′,5′-L-tetraiodo-thyronine, FT4)、促甲状腺激素(thyroid stimulating hormone, TSH)检测试剂盒(德国西门子医学诊断股份有限公司)，基因组甲基化处理试剂(德国Qiagen生物公司)、组织基因组提取试剂盒和凝胶回收试剂盒(天根生化科技有限公司)。主要仪器：纯水仪(杭州中灿科技有限公司)，德国西门子医学诊断有限公司化学免疫分析仪(型号: ADVIA centaur XP)，电泳仪(北京六一仪器公司)，PCR扩增仪(Eppendorf 公司)。

1.2 动物分组与建模

选取40只SPF级雌性SD大鼠(日龄35～40 d, 体质量150～170 g)，购自安徽医科大学动物实验中心，合格证号：NO. 340000200001326。40只大鼠随机均分为5组：低碘(LI)组、正常碘(NI)组、5倍高碘(5HI)组、10倍高碘(10HI)组、20倍高碘(20HI)组。……