胶原抗体联合LPS建立C57BL/6小鼠关节炎模型

韩大飞，方亦龙，檀学文，蒋海峰，许 振，涂佳杰，魏 伟

类风湿关节炎(rheumatoid arthritis，RA)是一种自身免疫性关节炎，其发病机制仍不清楚，导致现有治疗方法有诸多缺陷。临床前研究的动物模型对于深入阐明RA的发病机制，并寻求潜在的治疗靶点显得尤为重要。CAIA模型具有发病速度快，严重程度高，发病率高，疾病均一性较好，可高效诱导包括C57BL/6为背景的基因工程小鼠等多品系的优势。诱导C57BL/6小鼠需要使用高剂量的5-克隆胶原抗体混合物(50 mg/只)并使用高剂量脂多糖 (lipopolysaccharide, LPS)加强(50 μg/只)。然而前期预实验显示，使用高剂量的诱导剂，一方面给小鼠带来严重的不良反应，甚至出现死亡现象，不但导致异常的病理生理学改变，影响了关节炎模型发生与发展，而且影响了对候选药物治疗作用的准确判断。该实验降低了5-克隆胶原抗体混合物和LPS的剂量，在避免小鼠死亡，减轻不良反应的同时节约了试剂，而且能高效地诱导CAIA模型，这为RA发病机制的研究提供了合理的小鼠模型。

1 材料与方法

1.1 实验动物

所有实验均按照安徽医科大学动物实验伦理委员会批准的方案进行的。16只8周龄(22～24 g)雄性C57BL/6小鼠购于安徽医科大学实验动物中心，饲养在12 h的光/暗循环，恒温环境下的标准笼(4～5只/笼)中，并按照饲养要求提供食物及水的SPF环境。

1.2 试剂与仪器

小鼠单克隆2型胶原5-克隆胶原抗体混合物试剂盒(货号：53100)购自美国Chondrex公司；多聚甲醛固定液(中性)(货号：G1101)和新型脱钙液(快脱)(货号：G1107)购自武汉塞维尔生物科技有限公司；苏木精(货号：C0107)和伊红染色液(货号：C0109)购自上海碧云天生物技术有限公司；……