白桦脂酸对异氟醚诱导的发育期大鼠神经细胞损伤的保护作用

王东伟，刘海萍，王庆东，赫 赤，刘思洋，胡玉红，陈 萍，臧荣佳

（佳木斯大学附属第一医院1.麻醉科，2.妇产科，黑龙江 佳木斯 154002）

异氟醚（isoflurane，Iso）是一种临床常用的吸入性全身麻醉药，其可诱导新生动物的大脑神经细胞出现凋亡，严重者可能影响脑功能［1］，且该影响可长期存在，导致神经突触数量减少甚至消失，引起永久脑损伤，可表现为新生大鼠发育成熟后行为功能障碍［2］。白桦脂酸（betulinic acid，BC）是五环羽扇烷型三萜化合物。Ma等［3］研究认为，BC能通过血红素氧合酶1/核因子E2相关因子2/NF-κB信号通路抑制糖尿病模型小鼠的认知障碍。Jiao等［4］研究显示，BC能抑制脑缺血缺氧诱发的小鼠海马神经损伤，具有神经保护作用。本研究以发育期大鼠为研究对象，探讨BC对Iso诱导的发育期神经损伤的保护作用，为临床寻找能够有效减轻或消除Iso导致的发育期神经损伤的药物提供实验依据。

1 材料与方法

1.1 药品、试剂和主要仪器

Iso（江苏恒瑞医药有限公司，批号：20172831）；BC（中国科学院成都生物研究所，批号：18032423）；活性氧（reactive oxygen species，ROS）检测试剂盒和丙二醛（malondialdehyde，MDA）检测试剂盒（上海亨代劳生物科技公司）；线粒体膜电位（mito⁃chondrial membrane potential，MMP）检测试剂盒和Ca2+荧光探针检测试剂盒（BestBios生物科技有限公司）；Annexin Ⅴ-Biotin，Annexin Ⅴ-FITC和Annexin Ⅴ-PE（美国BD公司）。Fabius麻醉机（德国Drager公司）；流式细胞仪（美国Beckman公司）；荧光酶标仪（芬兰Thereto实验仪器公司）；麻醉箱（上海玉研科学仪器公司）；MindrayT8监护仪（深圳迈瑞公司）；Morris水迷宫实验系统（美国National Instruments公司）；血气分析仪（普朗公司）；分光光度计（V-1000，翔艺仪器上海有限公司）。

1.2 实验动物、分组和样本制备

7日龄SPF级SD大鼠80只，雌雄各半，体重17～20 g，佳木斯大学基础医学院动物中心提供，生产许可证号：SYXK（黑）2016-014。……