IL-6干预后人绒毛膜癌JEG-3细胞侵袭能力及MMP-2表达的变化

刘丽莎，张琳琳，袁恩武，石 瑛，杜红梅，高峻峻，李 伟，张 展

郑州大学第三附属医院检验科 郑州 450052

人类成功的妊娠过程依赖于绒毛外滋养细胞(extravillous trophoblasts, EVT)对子宫结缔组织和子宫螺旋动脉的侵袭作用，EVT侵袭能力降低可致母体血液无法充足地供应到绒毛间腔，妊娠期的多种不良结局由此引起[1-2]。已知基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases，MMPs)可参与细胞侵袭过程[3-4]。Ⅳ型胶原是滋养细胞外基质的主要组成部分，又是MMP-2、MMP-9发挥水解作用的底物，因此MMP-2和MMP-9被认为是参与滋养细胞外基质降解从而实现细胞侵袭的重要蛋白酶[5-7]。多项研究[8-9]结果显示，信号转导及转录活化因子3蛋白(STAT3)在乳腺癌和胃癌细胞中参与调控下游靶因子MMP-2和MMP-9的表达。此外，Deshmukh等[10]的研究表明，IL-6可以上调乳腺癌细胞内磷酸化STAT3(p-STAT3)的表达，从而激活STAT3信号传导通路，促进肿瘤细胞增殖和侵袭。人绒毛膜癌滋养细胞系JEG-3细胞的分子结构与EVT相似，多数学者采用该细胞系作为研究EVT侵袭功能的模型[11]。本研究中，我们首先观察了STAT3活性抑制剂对JEG-3细胞STAT3及MMPs表达的影响，以验证STAT3的作用通路，然后观察了IL-6干预后，JEG-3细胞侵袭能力、STAT3及MMP-2、MMP-9表达的变化，旨在探讨JEG-3细胞侵袭能力改变的机制，进一步探索由EVT侵袭能力失调导致不良妊娠的机制。

1 材料与方法

1.1 细胞来源与主要试剂JEG-3细胞购自中国北京鼎国昌盛公司。DMEM-H培养基购自Genview公司，小牛血清由Sigma公司提供，STAT3活性抑制剂(SD-1008)为R&D公司产品，IL-6购自Peprotech公司，侵袭小室购自康宁公司，荧光定量PCR试剂购自北京康为世纪公司，STAT3、MMP-9鼠抗人一抗[可……