抑制磷脂酰肌醇3激酶/心肌素信号通路对血管平滑肌瘤细胞增殖和侵袭能力的影响

崔明哲，王 恒，翟水亭，刘 恒，李卫校，徐如涛

河南省人民医院(郑州大学人民医院) 华中阜外医院血管外科 郑州 450003

平滑肌瘤是发生于平滑肌的良性肿瘤，可分为实性平滑肌瘤、上皮样平滑肌母细胞瘤以及血管平滑肌瘤(angiomyoma，AM)3个亚型[1]。其中AM是指发生于皮下或真皮深部的良性肿瘤，是血管平滑肌较为常见的病理变化之一[2]。AM可发生于人体多个组织器官，如子宫、肺、鼻腔、耳廓以及跟腱等[3]。磷脂酰肌醇3激酶(phosphatidylinositol 3-kinase，PI3K)是细胞膜受体酪氨酸激酶的下游介质，近年来，已有大量临床研究[4-5]表明，PI3K与蛋白激酶B相结合可明显抑制肿瘤细胞的增殖。心肌素(myocardin，MYOCD)主要存在于心脏和平滑肌组织，与多种病变密切相关，如心力衰竭、急性血管疾病和糖尿病等[6-7]。PI3K/MYOCD信号通路是近年来新发现的肿瘤抑制信号通路，有研究[8]推测激活该信号通路可能有抑制部分肿瘤细胞增殖的作用。本研究通过检测抑制PI3K/MYOCD信号通路表达的AM细胞增殖和侵袭能力的变化，探讨PI3K/MYOCD信号通路在AM发生发展中的作用。

1 材料与方法

1.1 仪器与主要试剂AM细胞和DMEM培养基(南京生航生物技术有限公司产品)。Lipofectamine 2000转染试剂(上海赛默飞世尔科技有限公司产品)；PI3K、MYOCD siRNA,PI3K、MYOCD以及内参U6的引物(上海生工生物工程公司产品)；PI3K、MYOCD、AKT、Bcl-2蛋白一抗和二抗(英国博欧特公司产品)。PCR检测试剂盒(上海研生实业有限公司产品)、CCK8试剂盒(北京华夏远洋科技有限公司产品)、Transwell小室(上海艾研生物科技有限公司产品)、Trizol试剂和反转录PCR试剂盒均(美国默克公司产品)、PCR仪及实时荧光定量PCR仪(美国 Bio-Rad公司产品)。……