新型冠状病毒肺炎合并感染Ⅰ型单纯疱疹病毒的诊断

李幸乐，卢世栋，马红霞，李 懿,叶 莹,黄学勇，郭万申

1)河南省疾病预防控制中心传染病预防控制所 郑州 450016 2)河南省传染病病原生物重点实验室 郑州 450016

新型冠状病毒肺炎(coronavirus disease 2019,COVID-19)是由新型冠状病毒(2019 novel coronavirus,2019-nCoV)引起的，以发热、干咳、乏力为主要表现的呼吸道传染病。与其他病毒性肺炎相比，COVID-19的早期临床表现不具有特异性，随着疾病的进展，患者可出现继发感染，临床表现更加复杂，对其他疾病的诊疗也有多方面的影响[1-5]。因此，在疾病的各个阶段，实验室诊断和鉴别诊断对于2019-nCoV感染的预防、控制和治疗具有非常重要的指导意义。本研究以一例COVID-19合并Ⅰ型单纯疱疹病毒(human herpesivirus Ⅰ,HSV-1)感染为例，通过实验室技术手段分析COVID-19感染的可能特征，以期为2019-nCoV的防控和临床治疗提供数据支持和技术支持。

1 对象与方法

1.1 调查对象选取河南省2020年1月1日至1月31日期间的COVID-19确诊病例12例作为研究对象。病例纳入标准：①发病前14 d内有武汉旅行史或居住史。②有发热和(或)呼吸道症状。③实时荧光定量PCR检测2019-nCoV核酸阳性。排除免疫缺陷性疾病患者。

1.2 病毒分离取2019-nCoV核酸阳性咽拭子样本进行细胞接种，采用Vero和Vero E6细胞系常规分离病毒，接种后逐日观察细胞病变效应。发生细胞病变者稳定传代；无细胞病变者盲传3代，3代均无细胞病变者按照阴性处理。

1.3 2019-nCoV核酸检测采用实时荧光定量PCR法对分离株病毒二代培养物进行2019-nCoV核酸检测。病毒分离株首先于56 ℃30 min灭活，然后采用西安天隆生物科技有限公司生产的病毒DNA/RNA提取试剂盒提取总RNA，用上海伯杰医疗科技有限公司生产的2019-nCoV核酸检测试剂盒进行鉴定，仪器为美国ABI公司生产的7500Fast实时荧光定量PCR仪，按照试剂盒和仪器使用说明操作。……