龙胆苦苷对H22 肝癌小鼠肿瘤生长抑制及抗血管生成的分析

张志恒,贾海燕,崔朝初,张莹雪

(1.聊城市中医医院肿瘤科,山东聊城 252000;2.河南科技大学医学院,河南洛阳 471000;3.山东中医药大学药学院, 济南 250355)

肝癌在我国高发,具有预后差、易转移复发、生存时间较短及恶性程度高等特点,在肿瘤引起的相关死亡中高居第2 位[1]。 化学治疗是治疗肝癌的常用手段,但常导致消化道及肝、肾损伤、骨髓抑制,并出现白细胞减少、便秘、腹痛腹泻、食欲不振、恶心呕吐等不良反应[2]。 龙胆苦苷是我国传统中药龙胆草及秦艽中的主要活性物质,属于环烯醚萜苷类化合物,具有健胃利胆、抗病原微生物、抗炎及保肝等多种药理作用[3]。 体外实验发现[4-7],龙胆苦苷对人卵巢癌及肝癌细胞等的增殖有抑制作用,但关于龙胆苦苷的体内抗肿瘤作用研究未见报道。因此,本研究以H22肝癌小鼠为研究对象,主要探讨龙胆苦苷对H22肝癌小鼠肿瘤生长抑制及抗血管生成分析,以期为进一步的临床应用奠定基础。

1 材料和方法

1.1 实验材料

1.1.1 实验动物

SPF 级 KM 雄性小鼠 60 只,体重 20~22 g,来源于北京维通利华公司[SCXK(京) 2017-0033]。 无菌手术在山东大学实验动物中心进行[SYXK(鲁)2019-0005]。 本实验获我院伦理委员会审批通过(LCZYYY2020012707),并按实验动物使用的3R 原则给予人道的关怀。

1.1.2 细胞

肝癌H22细胞,购于中国科学院上海细胞库。

1.2 主要试剂与仪器

龙胆苦苷为南京道斯夫公司产品,批号181116A,纯度>95%;干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素-2(IL-2)酶联免疫吸附法(ELISA)检测试剂盒,购于深圳达科为生物公司,批号分别为20180516、20180427;兔抗鼠碱性成纤维生长因子(bFGF)、转化生长……