庞彩莲,刘敏娟,林景涛,陈凯妮,黄嘉莹,吴品,周正维,许艳茹
东莞市大朗医院检验科,广东 东莞 523770
铜绿假单胞菌(PAE)是临床上常见非发酵病原菌,也是当前多重耐药菌较为难治的病原菌之一,近年来由于亚胺培南等碳青霉烯类抗生素的广泛应用,PAE产生了碳青霉烯酶,给临床抗感染治疗造成极大困难[1]。本研究收集东莞地区感染标本中分离的耐碳青霉烯类铜绿假单胞菌(CRPA)进行耐药分析及碳青霉烯酶表型检测,为临床合理用药及治疗提供理论依据。
1.1 菌株来源 收集2018年1月至2021年6月东莞地区二、三级综合性医院在临床标本中分离的CRPA共216株,其中痰标本139株,腹腔脓液17株,肺泡灌洗液30株,伤口分泌物12株,尿液10株,胸水3株,血液5株,收集菌株为患者的第一株菌株,剔除重复株。
1.2 试剂和设备 血平板、麦康凯平板、M-H琼脂平板、OXOID药敏纸片(江门凯林有限公司),VITEK 2-Compact全自动微生物鉴定仪、比浊仪、GN鉴定卡、GN09药敏卡等法国生物梅里埃原装配套产品(广州华鑫公司),亚胺培南缓冲液(上海科原实业发展有限公司)。
1.3 质控菌株 大肠埃希菌ATCC25922、铜绿假单胞菌ATCC27853均来自广东省临床检验中心。
1.4 菌株鉴定及药敏试验 取已分纯新鲜培养的平板上细菌,用无菌生理盐水调整菌悬液浓度至0.5个麦氏单位,使用法国生物梅里埃公司VITEK 2-Compact全自动微生物鉴定仪和GN卡、GN09卡进行菌株鉴定及药敏试验。
1.5 PAE产碳青霉烯酶及其表型检测 采用2017年CLSI推荐的eCIM试验检测CRPA是否产碳青霉烯酶[2-3]。取10μL纯菌落于2 mL胰蛋白胨大豆……