猪粪肠球菌的分离鉴定与药物敏感性分析

肖正中，凌文卿，蔡秋香，陈少珍，周文杰，邬苏晓

（韶关学院 英东生物与农业学院，广东 韶关 512005）

粪肠球菌也称粪链球菌，广泛存在于人和动物肠道中，在养殖生产中常作为益生菌使用［1］，同时也是一种重要的条件致病菌，能够引起人和动物多个器官的感染［2-3］.近年来关于粪肠球菌感染的报道也越来越多［4-5］.由于抗生素的广泛使用，许多粪肠球菌逐渐发展成为获得耐药性菌株，其所致感染较难控制，使得临床药物治疗的难度越来越大，一些经验性的药物治疗很难充分发挥作用［6-8］，由此造成养猪生产中病死率增加的风险也逐步提高.本实验旨在通过对猪源粪肠球菌的分离鉴定及分离株的药物敏感性分析，为猪场临床合理用药提供参考，为动物源细菌耐药性监测提供数据.

1 材料与方法

1.1 实验材料

1.1.1 样品

猪直肠粪样31 份，采集于粤北某猪场.

1.1.2 药品与试剂

PSE 培养基、M-H 培养基、叠氮化钠葡萄糖肉汤培养基均购自青岛海博生物公司；PCR 相关试剂（Premix TaqTM、DNA DL2000 Maker、缓冲液等）购自TaKaRa 公司；药敏试纸购自杭州天和微生物试剂有限公司.

1.2 方法

1.2.1 样品采集

以无菌棉拭子于猪肛门处采样，接种于叠氮化钠葡萄糖肉汤培养基，于37 ℃增菌培养12 h.

1.2.2 细菌分离培养

取增殖培养的菌液接种于PSE 培养基，37 ℃培养24 h，挑取黑色单菌落，接种于叠氮化钠葡萄糖肉汤培养基中进行初次扩纯培养.将扩纯培养的菌液划线接种于PSE 培养基，37 ℃培养24 h，挑取黑色单菌落，再次进行纯化培养.

1.2.3 革兰氏染色

取纯化培养的细菌进……