乳腺癌耐药动物模型建立及咯萘啶(PND)逆转乳腺癌耐药的效果观察

王新征 侯永强 汲权威

化疗是控制肿瘤的有效方法，但多药耐药(MDR)是化疗失败的重要原因。目前，寻找积极的措施逆转肿瘤多药耐药迫在眉睫。抗疟新药咯萘啶(PND)是1种逆转肿瘤耐药的新药，其是否具有逆转肿瘤耐药的作用尚在研究。本研究选择人乳腺癌细胞系MCF-7和其耐药细胞MCF-7/ADM建立裸鼠荷人肿瘤耐药和敏感细胞移植瘤模型，以评估抗疟新药咯萘啶(pyronaridine，PND)的逆转肿瘤MDR的体内作用。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 药物和试剂 RPMI 1640培养基，Gibco产品：胎牛血清，中国医学科学院血研所生产；注射用盐酸阿霉素；注射用顺铂；注射用磷酸咯萘啶，由天津药物研究院；实验所用药均以无菌蒸馏水配成相应浓度备用。

1.1.2 细胞系与细胞培养 乳腺癌敏感细胞MCF-7和耐药细胞MCF-7/ADM；常规传代培养。

1.1.3 实验动物 alb/c裸鼠(nu/nu)，雌性，5.7周龄，体重16～229，购自中国生物制品鉴定所动物中心。

1.1.4 实验仪器 紫外分光光度计UV-3000型、高压液相色谱仪Waters510；酶标仪Microplate Reader450；流式细胞仪；激光光密度扫描仪；高速台式离心机TGL-16c；低温离心机。

1.2 实验操作

1.2.1 裸鼠移植瘤单侧模型的建立 采用人耐药细胞MCF-7/ADM和乳腺细胞系MCF-7接种于裸鼠上，建立耐药单侧和肿瘤敏感模型。接种位置在右侧前肢根部背侧，单只小鼠接种细胞数量为0.2 ml，肿瘤以每6～9天100～300 mm3的速度生长，随机分组，各组为6只小鼠。

1.2.2 体内抗耐药肿瘤活性试验 分组为3组：对照组A组、对照组B组、观察组。A组注射相应溶剂；B组注射阿霉素；观察组注射不同剂量的PND，高剂量∶中剂量∶低剂量=4∶2∶1。耐药移植肿瘤接种后第9天开始给药，移植肿瘤接种后第6天开始给药，每隔3天给药1次，腹腔注射。……