藏羊HSP27基因过表达和沉默载体构建及对卵泡发育的功能初步分析

张春梅，贾建磊*，谢 雯，任 昊，张怀霞，张莹莹，陈 倩

(1.青海大学农牧学院，西宁 810016；2.青海大学实验室管理处，西宁 810016)

热休克蛋白27(heat shock protein 27，HSP27)是细胞或生物体在应激情况下由热激基因所编码合成的具有高度保守性的一组小分子蛋白质，具有多种生物学功能[1]。先前的研究表明，HSP27最主要的特征就是具有分子伴侣功能，比如在响应热和氧化应激时，诱导型的HSP27表达增加并激活PKB/Akt/RAC信号通路，HSP27的分子伴侣活性不断增强从而保护细胞功能[2]。HSP27具有抗细胞凋亡作用，HSP27的磷酸化二聚体结合DAXX可以在Fas-Fas L介导凋亡，阻止其与ASK1和Fas的相互作用，从而阻断DAXX介导的凋亡[3-4]。HSP27具有抗氧化应激作用，在细胞受到氧化应激时HSP27通过提高谷胱甘肽的水平和降低铁的含量来提升细胞的抗氧化能力[5]。此外，HSP27在哺乳动物的繁殖过程中发挥着重要的功能且与卵泡发育密切相关[6]。Wang等[7]发现，HSP27基因在培养后的小鼠卵泡中广泛表达于卵母细胞、颗粒细胞、卵泡膜细胞。Khan等[8]发现，在卵泡发育过程中HSP27蛋白与转胶蛋白起分子伴侣的作用，它的表达和胶原Ⅰ、胶原Ⅱ具有时空相关性。马红梅和刘嘉茵[9]发现，HSP27基因在哺乳动物体内除了作为分子伴侣保护蛋白质免受损伤外，还广泛地参与了卵子的发生和形成过程，与哺乳动物的繁殖功能密切相关。Sreekanth等[10]发现，在卵泡发育过程中，磷酸化的HSP27增强细胞对应激的耐受性，并增加活细胞数量，激活 p38-MAPK 通路使得孕酮、雌二醇和类固醇蛋白水平上升从而促进卵泡发育成熟。

藏羊在青海省内主要分布在青南和环湖牧区，其生活能力强、耐粗、耐寒且具有独特的生物学特性和经济特性。……