蔬菜农药残留快速检测

佟艳琼，王光鸿

（罗平县板桥镇农业综合服务中心，云南 罗平 655808）

农业生产中蔬菜安全性问题以农药残留超标最为常见和严重，其中以有机磷和氨基甲酯类农药残留超标最为突出。蔬菜农药残留快速检测可通过农药残留检测仪快速对蔬菜中有机磷和氨基甲酯农药残留含量进行科学检测并分析得出数据，最终得知蔬菜农药残留量是否超标，从而监控蔬菜农药的合理使用和杜绝农药残留超标蔬菜上市销售。下面主要从采样、制样、检测、结果判定等技术步骤介绍几种常见蔬菜中有机磷和氨基甲酯类农药残留的快速检测方法。

1 快速检测方法及原理

方法为GB/T 5009.199—2003酶抑制率法。

在一定条件下，有机磷和氨基甲酯类农药对胆碱酯酶正常功能有抑制作用，其抑制率与农药的浓度呈正相关关系。正常情况下，酶催化神经传导代谢产物(乙酰胆碱)水解，其水解产物显色剂反应，产生黄色物质，用分光光度计测定吸光度随时间的变化值，计算出抑制率，通过抑制率可以判断出样品中是否含有有机磷或氨基甲酯类农药的存在。

2 采 样

2.1 大田采样

依据《国家标准GB 8855—88新鲜水果和蔬菜的取样方法》，针对罗平县板桥镇蔬菜生产现状，在板桥菜园蔬菜生产基地随机对大白菜、小瓜、豆荚、莴苣、生菜、菠菜、青菜各采样2 kg，结球甘蓝采样3～5个。

2.2 采样卡登记

依据采样顺序边采样边在蔬菜农残快速抽样记录卡上准确填写大白菜、小瓜、豆荚、莴苣、生菜、菠菜、青菜和结球甘蓝的采样顺序编号、相关单位和个人、样品名称、生产地点、采样日期、参加采样人员等信息。

3 检测前准备

3.1 检测器材

HHX-SJ10NC蔬菜农残检测机1台、菜刀1把、菜板1块、钳子1把、2 000 g电子天平1台、漩涡混合器1台、0.8 cm玻璃棒1根、500 mL烧杯1个、500 mL储液瓶1个、20 mL塑料注射器1支、100 mL玻璃烧杯16个、10 mL塑料样品提取试管9个、试管架1个、3 mL玻璃比色皿9个、5孔比色皿架2个、1 000～5 000 μL缓冲液移液枪1把、缓冲移液枪头9个、20～200 μL酶试剂液枪1支、20～200 μL显色试剂液枪1支、20～200 μL底物试剂移液枪1支。

3.2 试剂配制

3.2.1 缓冲液

将缓冲液试剂袋中的试剂取出，倒入500 mL烧杯中，加入500 mL饮用纯净水，用0.8 cm玻璃棒搅动至溶解，倒入500 mL储液瓶中备用。平常要在2～4 ℃冰箱内冷藏保存，切勿冷冻结冰。

3.2.2 底物

用20 mL塑料注射器向标有“底物”的试剂瓶中注入13 mL饮用纯净水溶解、混匀即可。平常要在2～4 ℃冰箱内冷藏保存，切勿冷冻结冰。

3.2.3 显色剂和酶试剂

显色剂和酶试剂无需配制可直接使用。平常要在2～4 ℃冰箱内冷藏保存，切勿冷冻结冰。

3.3 试剂使用

取样前先将已配好的缓冲液、底物、显色剂、酶提前30 min从冰箱里取出，恢复到室温。

3.4 检测仪打开

取样前要先打开检测仪，检查样品室内没有样品放入后再打开预热10 min以上。

3.5 取 样

先剔除大白菜、小瓜、豆荚、莴苣、生菜、菠菜、青菜和结球甘蓝不能食用部分，擦去食用部分表面的泥土再采用4分法（即取4份中的1份）进行取样，每种蔬菜依照采样顺序切成1 cm大小的菜样分别装入8个100 mL的玻璃烧杯中，并贴上取样顺序标签。检测结果出来之前，要保存好样品备用。

4 检 测

4.1 制 样

用钳子从大白菜、小瓜、豆荚、莴苣、生菜、菠菜、青菜和结球甘蓝制样烧杯中取样在天平上称取2 g，依次放入8个100 mL烧杯中，加入10 mL缓冲液，用漩涡混合器振荡提取2 min，制成待测样品液备用。

4.2 空白对照

4.2.1 空白对照制作

在试管架上的1个空塑料样品提取试管中加入酶试剂100 μL、缓冲液2 500 μL后在漩涡混合器混匀静置10 min后再加入100 μL显色试、100 μL底物试剂。

4.2.2 空白对照检测

依次加入显色试剂和底物试剂后快速将空白样品提取瓶中的对照液倒入比色皿架上的比色皿中（手不能触摸比色皿光面，如光面有污物或液体可用过滤纸擦干净），将比色皿放入检测仪检测的通道内并按下对照键，1 min后便可看到检测结果，经检测空白对照值是0.226。测定结束后，按下确定键，仪器自动保存当前对照值。

空白对照测量时，1 min空白对照吸光度变化值△A应在0.15～0.30，才可进行下一步试验。如果空白对照△A＜0.15时，需要重做空白对照，若重复多次的空白对照△A＜0.15时，必须更换酶试剂；如果空白对照值△A＞0.30时，要调试减少仪器的测量时间，重新做空白对照。

4.3 检测样品液制作

在8个塑料样品提取试管中分别加入酶试剂100 μL后，依次提取并加入蔬菜样品液各2 500 μL（每取1个样品液都要换1次样品移液枪头），分别混匀静置10 min后再依次加入100 μL显色试剂和100 μL底物混匀，依次倒入8个比色皿中，将比色皿依次快速放入8个检测通道并按下样品键，1 min后便可看到检测结果（见表1）。测定结束后，按下确定键，仪器自动保存数据，按下打印键便可打印当前测试结果。

表1 蔬菜样品检测结果表

检测部分蔬菜样品及仪器

4.4 检测结果判定

根据GB/T 5009.199—2003要求，抑制率≥50%时为阳性，抑制率＜50%时为阴性。

（1）若样品抑制率＜40%，说明样品中农药残留含量符合国家规定标准，判定该样品为质量合格样品。所以以上检测的8个样品全部都是合格样品。

（2）若样品抑制率为40%～49%，说明样品中农药残留含量较高，为可疑农残超标样品。

（3）若样品抑制率≥50%，说明此样品农残超标。

（4）属于农残超标或疑似超标的样品，建议对该样品重做1次，重做结果仍旧超标的，可将原菜样送往上级农产品质量安全检测站进一步检测并向相关单位或个人下发农产品（源头）抽样检测结果和禁用通知书。

5 酶抑制率法优缺点

5.1 优 点

酶抑制率法优点为简单、方便、快捷、成本低廉。整个检测过程只需30 min左右，可以作为传统仪器分析方法的有益补充，针对市场、农场蔬菜农药残留量进行快速筛选监测，保证上市蔬菜食用的相对安全性。

5.2 缺 点

5.2.1 误差较大，存在检测盲区

酶试剂易失活，导致反应不稳定，检测结果误差较大，重复性不好，实际应用中的确认率为60%～70%；存在检测盲区，只能检测有机磷和氨基甲酯，不能检测有机氯类、菊酯和其他类别的剧毒农药。

5.2.2 不适合检测易出现假阳性的产品

不适合检测葱蒜类、香菜、韭菜、番茄、胡萝卜、茭白、蘑菇、花椒等14种容易出现假阳性的农产品。

5.2.3 需培训专职技术员

需要对检测人员进行专门培训，否则将会对出现的问题无法正确处理或判断，得出错误的结果。

6 结 语

随着消费者对农产品质量安全的日益关注，以及各级检测部门的重视，酶抑制率法以其灵敏性和准确性较高及成本低等优点，使农药残留检测技术必将向着更加快速方便、灵敏可靠的方向发展。板桥镇蔬菜生产相对分散，从采收到市场销售经时较短的情况下，酶抑制率法虽然存在一些不足，但却具有其他检测法无法比拟的优势，应在批发市场、农贸市场、生产基地等推广应用。