基于TLR4/NF-κB信号通路探讨肃金方治疗感染后咳嗽风邪犯肺证临床效果及机制

马 真,张晓阳,杨久清,邓敬华,王玉栋

感染后咳嗽是临床常见呼吸系统疾病,主要由上呼吸道感染引起,属于亚急性咳嗽,指急性期感染得到控制后,咳嗽仍可持续3～8周,且肺部检查无阳性特征,虽为小恙,却颇难治愈[1-2]。现感染后咳嗽的致病机制尚未明确,但普遍认为与气道炎症、气道黏膜损伤有关[3-4]。有研究证实,TOLL样受体4(TLR4)/核因子-κB(NF-κB)信号通路的过度表达可引起炎症反应,对感染后咳嗽患者病情诊断具有较高敏感性[5]。目前,西医主要使用中枢性镇咳药、糖皮质激素和抗组胺H1受体拮抗剂等治疗感染后咳嗽,但此类药物长期使用患者易产生耐受性,且不良反应较多。中医将感染后咳嗽归为“外感咳嗽”范畴,并认为肺为娇脏,与天气直接相通,外感风邪,伏于肺络,肺失宣降,则肺气上逆,故而发病[6]。鉴于此,本研究在治疗上从宣肺化痰、疏风散寒、滋阴补气入手,基于TLR4/NF-κB信号通路深入挖掘我院中医师经验用方肃金方治疗感染后咳嗽风邪犯肺证临床效果及机制,现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2020年5月—2022年6月来我院就诊符合中西医诊断标准[7-8]的感染后咳嗽100例,按治疗方案不同将其分为联合组和常规组2组各50例。2组性别、年龄和病程等一般资料比较差异无统计学意义(P>0.05),见表1,具有可比性。

表1 2组感染后咳嗽一般资料比较

1.2 治疗方法

常规组采用常规药物治疗,给予二氧丙嗪片(国药准字H14020610,山西国润制药有限公司)每次5 mg,每日3次口服;肺力咳胶囊(国药准字Z20025240,贵州健兴药业有限公司)每次0.9 g,每日3次口服。根据患者临床症状,可适当增减药物剂量。联合组采用肃金方联合常规药物治疗。常规药物治疗方法等同常规组。肃金方处方组成:蜜枇杷叶20 g,蝉蜕8 g,紫菀10 g,白前15 g,僵蚕10 g,乌梅15 g,前胡20 g,荆芥10 g,芦根30 g,射干15 g,橘红10 g,防风15 g,牛蒡子10 g,细辛3 g,五味子10 g,甘草10 g。随症加减:咽干加麦冬12 g;痰多加浙贝15 g;咽痛加黄芩20 g;咽痒加木蝴蝶3 g;大便发干加炒卜子15 g,瓜蒌30 g,枳实10 g。凉水浸泡1 h后,急火煎开,改慢火煎25 min,将滤液滤出,复加水再煎,二煎混合,分温再服,每日1剂,缓慢服药使药液浸润咽喉部。2组均连续治疗2周。

1.3 观察指标

治疗前、治疗1周后和治疗2周后评价比较2组中医证候积分、咳嗽症状积分、生活质量和TLR4/NF-κB信号通路相关指标。中医证候积分参照《中医病证诊断疗效标准》[9]中咳嗽的临床表现,将主症咳嗽、咽干、咽痒按严重程度分别计0、2、4、6分,次症咳痰按严重程度计0、1、2、3分,分值越高表明相应症状越严重。咳嗽症状积分由患者据自身24 h的咳嗽症状进行计分,日间和夜间咳嗽分值范围均为0～5分,分值越高表明咳嗽越剧烈,总分=日间评分+夜间评分。采用中文版莱彻斯特咳嗽生活质量问卷(LCQ)评价患者生活质量,该问卷包括心理问题(7项)、生理问题(8项)和社会问题(4项)3个维度,19个评价因子,总分与生活质量呈正相关。抽取2组清晨空腹静脉血3～5 mL,在4 ℃温度条件下高速离心15 min(3000 r/min),取上清液,应用F.A.M.E.24/30型酶标仪(瑞士哈美顿公司)采用酶联免疫吸附试验检测TLR4、NF-κB、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)。

治疗2周后,评价比较2组临床效果。参照中医症候积分对2组临床疗效进行评价比较。疗效指数=(治疗前分数-治疗后分数)/治疗前分数×100%。总有效率=(治愈+显效+有效)/总例数×100%[10]。观察比较2组治疗期间不良反应,包括便秘和口干等。

1.4 统计学方法

2 结果

2.1 中医证候积分比较

2组组内不同时间咳嗽、咽干、咽痒和咳痰积分总体比较差异有统计学意义(P<0.01)。治疗1和2周后,咳嗽、咽干、咽痒和咳痰积分2组均低于治疗前,且联合组低于常规组(P<0.05)。见表2。

表2 2组感染后咳嗽不同时间点中医证候积分比较分)

2.2 咳嗽症状积分和LCQ评分比较

2组组内不同时间咳嗽症状积分和LCQ评分总体比较差异均有统计学意义(P<0.01)。治疗1和2周后,咳嗽日间和夜间积分2组均低于治疗前,且联合组低于常规组;LCQ评分2组均高于治疗前,且联合组高于常规组(P<0.05)。见表3。

表3 2组感染后咳嗽不同时间点咳嗽症状积分和LCQ评分比较分)

2.3 TLR4/NF-κB信号通路相关指标比较

2组组内不同时间TLR4/NF-κB信号通路相关指标总体比较差异有统计学意义(P<0.01)。治疗1和2周后,TLR4、NF-κB、TNF-α、IL-6 2组低于治疗前,且联合组低于常规组(P<0.05)。见表4。

表4 2组感染后咳嗽不同时间点TLR4/NF-κB信号通路相关指标比较

2.4 临床疗效比较

治疗2周后,总有效率联合组高于常规组(P<0.01),见表5。

表5 2组感染后咳嗽治疗2周后临床效果比较[例(%)]

2.5 不良反应比较

治疗期间,联合组出现口干1例,常规组出现便秘2例,口干1例,2组不良反应比较差异无统计学意义(P>0.05)。

3 讨论

《景岳全书·咳嗽篇》中记载:“咳证虽多,无非肺病”,可见咳嗽与肺关系密切[11]。我院王玉栋主任根据感染后咳嗽“风、寒、燥、痰”等病理因素,结合“风为百病之长”“风盛则动,风盛则痉急”的论述,提出“风邪”是感染后咳嗽主要病因。外风侵袭肌表,而风邪为六淫之首,邪气由皮毛或口鼻而入,伏于肺腑,遏阻肺气,外邪滞留,久而不去,日久而肺气不宣,气机上犯咽喉,故而咳;且风性主动,善行而数变,风盛则痒,痒咳难止,寒热之象不显,故治则应以清咽利喉、疏风宣肺为主[12-13]。

肃金方为我院协定处方,强调辨证施治,主要由蝉蜕、僵蚕、前胡、橘红、紫菀、白前、乌梅、荆芥、蜜枇杷叶和防风等药物组成,可随症加减。方中僵蚕、蝉蜕皆为虫类,善走窜,性剽悍,可止咳解痉,祛风止痒;前胡苦泄辛散微寒,能散风清热,降气化痰;紫菀辛散苦降温润,可润肺下气,消痰止咳;白前祛痰止咳;乌梅敛肺生津;蜜枇杷叶化痰止咳;荆芥微温不燥,辛而不烈,疏风止痉,散邪开郁;芦根味甘性寒,可清热泻火,生津止渴;射干性寒微毒,主治咳嗽气喘,咽喉肿痛;橘红燥湿化痰;防风疏风解表,祛风解痉;牛蒡子疏风散热,宣肺利咽;细辛祛风散寒;五味子镇咳祛痰;甘草不仅能润肺止咳,还可益气补中,调和诸药[14-16]。纵观此方药性平和,既无大辛大热,又无大苦大寒之品,契合感染后咳嗽的病机,可共奏肃肺止咳、疏风清咽之功效。现代药理学研究证实,蝉蜕中含有多种微量元素和氨基酸,有镇静和抗炎等作用;荆芥中的荆芥内酯、桂皮酸等成分能抑菌、抗炎、抗病毒;枇杷叶、甘草等具有止咳、抗氧化,提高机体免疫力等作用;乌梅可改善微循环、扩张血管,有利于调节免疫功能[17-19]。本研究结果显示,治疗1和2周后,咳嗽、咽干、咽痒、咳痰积分和咳嗽日间、夜间积分联合组低于常规组,LCQ评分联合组高于常规组;治疗2周后,总有效率联合组高于常规组。说明与常规药物治疗相比,肃金方联合常规药物治疗感染后咳嗽患者可明显改善临床症状,提升生活质量,提高临床效果。分析其原因为肃金方遵循“阳者阴之,上者下之”原则,以肃肺止咳为主,有效缓解了风邪犯肺之证。此外,本研究结果显示,治疗期间2组不良反应发生率比较差异无统计学意义,且2组出现的不良反应均较轻微,不影响日常生活工作,说明肃金方联合常规药物治疗感染后咳嗽患者安全性较好。

既往研究显示,TLR4/NF-κB信号通路在氧化应激和炎症反应等过程中发挥重要作用[20]。病原体侵入呼吸道后可激活机体免疫-炎症信号通路,间接激活气道感觉神经,增强气道高反应性,还可释放大量炎性介质,损伤气道黏膜上皮细胞。TLR4是跨细胞膜受体蛋白,广泛存在于组织细胞中,可特异性识别损伤相关分子模式与病原体相关分子模式,能激活NF-κB导致免疫调节和炎症的基因转录,引起下游信号通路的级联反应,从而促进IL-6和TNF-α等炎性因子大量释放,参与气道炎症的进展[21-22]。本研究结果显示,治疗1和2周后,TLR4、NF-κB、TNF-α、IL-6联合组低于常规组,表明肃金方联合常规药物治疗感染后咳嗽患者能抑制炎性因子分泌,分析原因可能与肃金方能调控TLR4/NF-κB信号通路有关。贾璐等[23]通过小鼠实验发现,五味子中的五味子乙素能通过抑制TLR4/NF-κB信号通路,发挥免疫和抗炎作用,本研究结论与其一致。

综上所述,肃金方联合常规药物治疗感染后咳嗽风邪犯肺证患者效果良好,可改善临床症状,抑制炎性因子表达,提高生活质量,且安全性好;分析原因可能与肃金方能调控TLR4/NF-κB信号通路有关。然而,本研究因时间、经费有限,未能开展临床试验研究,今后研究需结合药理学、药效学及动物实验等进一步阐明本研究结论的作用机制,从而为临床治疗感染后咳嗽提供新思路。